北京大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒)厂商

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒)厂商在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒)厂商
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：20次
英文名：Large Plasmid Extraction Kit(for cell transfection)
本试剂盒适用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型质粒制备。常规的离心柱型质粒抽提试剂盒并不适用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型质粒DNA的抽提。这主要是因为大型质粒DNA分子量很大，常常会超过100kb而且一般拷贝数低产量低，使用常规的离心柱吸附膜吸附效率和产量很低而且过膜会打断这些大分子量的质粒DNA。本试剂盒采用改进碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA，采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂，只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质，获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右，得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在Eppendorf管中操作，方法简单，不需特殊设备，无需过柱，不用酚氯*(代"仿")抽提；基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒，不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA，对质粒损伤小，即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒，只要碱裂解法能够提取，就可以有效纯化。此外溶液型的试剂可以按照比例放大缩小进行小提/中提/大提，最后可选择任意小体积溶解质粒，浓度可高达3μg/μl。

试剂盒组份(20次)：
RNaseA(10mg/ml)-————————1.3ml
溶液P1—————————————130ml
溶液P2—————————————100ml
溶液PⅢ-————————————110ml
杂质清除剂A-——————————3ml
杂质清除剂B-——————————30ml
内毒素清除剂——————————10ml

试剂盒特点：
1.不需要使用有毒的苯酚，氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从150-200 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取0.4-1mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80-90 %。
2.获得的质粒产量高，超螺旋比例高，纯度好，可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
3.内毒素含量极低（<0.1 EU/μg DNA），可直接应用于细胞转染。

注意事项
1. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大质粒时操作动作要轻柔，应该使用剪大了开口的吸头，防止机械剪切对DNA 的损坏。
3. DNA 沉淀液沉淀离心后，可能看不到明显沉淀。如未见沉淀，担心DNA 丢失，可保留上清液，待完成全部操作后电泳鉴定，以确定是否获得终产物（数百微克DNA 离心沉淀在管的侧壁上，可能无法看到明显团块）。
4. 得到的质粒DNA 可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1 相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2 条或者多条DNA 条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过95%。
5. 质粒DNA 确切分子大小， 必须酶切线性化后，对比DNA 分子量Marker 才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道确切大小。

储存条件：室温，有效期18个月。

本品别名：大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒)|大型质粒提取试剂盒|大型质粒大量制备试剂盒|无内毒素大型质粒提取试剂盒|转染级质粒大量提取试剂盒|细胞转染用大型质粒制备试剂盒|BAC大型质粒提取试剂盒|PAC大型质粒提取试剂盒|P1大型质粒提取试剂盒|Cosmid大型质粒提取试剂盒

北京大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒)厂商极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·RNA快速提取试剂盒(多糖多酚植物)
编号：ALH038
英文名称：Complex Plant RNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒适用于多糖、多酚及其他复杂植物组织细胞总RNA快速提取，无苯酚、氯*(代"仿")RNA快速提取技术基础上，又采用基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶， 离心沉淀去除多糖多酚和次级代谢产物，然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱，然后RNA被选择性洗脱滤过， 吸附在基因组DNA清除柱上的残留DNA无法洗脱连同柱子一起丢弃从而清除掉DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

本试剂盒特点：
1.完全不使用有毒的苯酚，氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷，单个样品操作一般可在25分钟内完成，世界上最简单快速的试剂盒。
3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.可以提取包括复杂中草药如石斛/丹参/雪莲/人参、复杂淀粉种子如水稻/小麦/玉米种子、复杂果实如葡萄/蓝莓/草莓/西瓜果实、复杂抗逆植物如冬青/松针/沙棘/胡杨、复杂花卉月季/玫瑰/梅/牡丹花、复杂多糖植物紫菜/仙人掌/芦荟水稻种子等数百种国内外试剂盒提取失败的样品。
5.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.2，无DNA残留,可用于荧光定量PCR、RT-PCR、芯片、二代测序、Northern-blot等各种实验。

试剂盒组份：

组份	50次
裂解液CLB	50ml
裂解液RLT Plus	25ml
去蛋白液RW1	40ml
漂洗液RW	10ml
RNase-freeH2O	10ml
基因组DNA 清除柱和收集管	50套
吸附柱和收集管	50套

注意事项：
1. 所有的离心步骤均可在室温完成（4℃离心也可以），使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备β-巯基乙醇，乙醇，研钵(可选)。
3. 样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留（DNase 消化也无法做到100%无残留），本试剂盒产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术，绝大多数DNA 已经被清除，不需要DNase 消化，可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物，以穿过mRNA中的连接区，这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup) ，请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。

储存条件：室温，有效期12个月。


北京大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒)厂商关键词：大型质粒大量制备试剂盒,大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒),无内毒素大型质粒提取试剂盒,＞10KB质粒

7235-40-7 β-胡萝卜素(原装) β-Carotene
113-24-6 Pyruvic Acid 丙酮酸钠
ARB14143 小鼠β淀粉样蛋白(Aβ)Elisa定量检测
BL0113 10000*gelred 核酸染料
BTN130957 免RNA提取RT-PCR试剂盒 Cell Lysate RT-PCR Mix
9005-65-6 Tween-80 吐温-80
BL0814 HRP标记羊抗大鼠IgG抗体
002008 枸橼酸纳抗凝马血 100ml|500ml
十二烷基吡喃葡萄糖苷 L-Arginine 59122-55-3
DP329 磁珠法基因组提取试剂盒
ARB10402 人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)酶联免疫定量检测 Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,strail ELISA KIT
ARB12779 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA代测服务 Mouse α1-acid glycoprotein,α1-agp ELISA KIT
ARB11435 人热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA检测服务 Human heat shock protein glycoprotein 96,hsp gp96 ELISA KIT
ARB12700 大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)酶免分析 Rat glucocorticoid receptor-α,gr-α ELISA KIT
BL1170 通用基因组DNA提取试剂盒
北京大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒)厂商关键词：大型质粒大量制备试剂盒,大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒),无内毒素大型质粒提取试剂盒,＞10KB质粒


·PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色)
编号：ALH378
英文名称：PAGE protein staining kit
规格：250ml|1000ml
本试剂盒适用于快速检测PAGE胶上的微量蛋白质，它的敏感度几乎可以达到银染的敏感度（ng级水平或者更高），但是比银染简单、稳定、重复性高。染色液所含有的成份和PAGE胶中的SDS、TRIS共同作用形成特殊复合物沉淀在胶基质中形成白色的背景染色。有蛋白的地方，蛋白质的存在干扰这种复合物沉淀的形成，因此蛋白条带仍旧保持透明无色，在黑色的背景下，就可以清晰见到透明的蛋白条带。

试剂盒组份(250ml)：
染色液—————————250ml
显色液—————————250ml
脱色液—————————125ml

产品特点：
1.电泳后采用两个简单步骤，15分钟内完成全部过程。
2.环保染料，完全不含有各种醋酸、甲醇等有毒有刺激性成份。
3.蛋白条带为不透明白背景上的透明条带，灵敏度为传统方法的10倍以上（纳克级或者更高）。
4.可逆染色，完全不影响蛋白性质，不影响抗体抗原结合性质。如果需要可以脱色15分钟后继续做蛋白电洗脱（切下特定条带脱色后洗脱下来可以用来做抗原生产使用）、定量、Western blot实验、质谱分析、N末端测序等。
5.在普通双蒸水中可以保留一年以上，不退色，缩小，蛋白质不扩散，一年后依然可以用来做Western blot等蛋白微分析。

操作步骤：
1. 染色
1) 电泳后用清水冲洗胶30-60 秒钟，然后将PAGE 胶放置于一个透明的玻璃培养皿中，根据胶大小倒入适量的染色液（确保胶都浸没在染色液内，20-25ml 足够染色一块普通的8×10cm mini 胶了），摇床上轻摇染色10-15 分钟(10-15%胶15 分钟，5-7.5%胶可缩短时间到10 分钟)。
2) 倒弃染色液，加入20-25ml 的显色液，立刻同时用手轻摇胶显色0.5-1 分钟（将透明培养皿放在一个黑色（暗）背景上观察条带出现情况，此时在不透明的白背景上应该看到透明的蛋白条带，不要显色时间过长，过长反而会降低分辨率）。
3) 看到满意条带后，用清水冲洗1-2 分钟后，放置于蒸馏水中保存。
2. 脱色
1) 根据个人需要将所需目的条带切下后或者直接整块胶加入适量脱色液，摇床上轻摇10 分钟或者直到脱色完全，最后用清水冲洗几次。
2) 现在胶可以用于蛋白电洗脱，Western blot 等操作，或者可以再用传统方法永久染色。

问题与解决方法
●没有见到条带可能的原因分析
1. 应该把透明培养皿放在黑色背景上看，条带为黑背景上面透明的条带。
2. 染色过头了。染色时要在暗背景上监测蛋白条带出现情况，一旦见到满意条带要立刻用蒸馏水冲洗停止染色。对于已经染色过头的胶，可以用脱色液部分脱色（胶脱色后，还可以再次反复染色）。
3. 蛋白浓度太低了，检测上样蛋白的浓度。
●干胶后，条带不见了可能的原因分析
这是一种可逆的负染色方法，干燥以后蛋白条带就和背景区分不出来了，因此不可以做成干胶。如果要长期保存，可以脱色后再用传统方法染色保存。
●染色后未脱色即直接转膜做Western blot效果不好可能的原因分析
应该脱色后才转膜做Western blot。

储存条件：室温避光，有效期12个月。

我公司强烈推荐DNA纯化系列产品，热情期待您的咨询选购北京大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒)厂商。