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广州市益满生物科技有限公司
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文献和实验1. 醋酸一醋酸钠缓冲液(pH5.0): A液:3M醋酸钠溶液:称取NaAC·3H2O(M=136.09)40.8g溶于蒸馏水,然后定容至100mL。 B液:2M醋酸溶液:称取12g醋酸加蒸馏水定容至100mL。 将A、B两液按7:3(V/V)混合即得,使用时事先用pH计校正。 2. pH5.0 0.5M醋酸一醋酸钠缓冲液:称取30g冰醋酸加12g NaAC·3H2O产溶于100mL溶液瓶中,用蒸馏水稀至刻度。也可用3M醋酸缓冲液稀释制得。 3. 2%大肠杆菌脱羧
对照:将1ml样品稀释液(sample diluent)加至标记好的小瓶中作为阴性对照。阳性对照:1ml阳性对照液(positive control)溶解一瓶阳性对照, 颠倒混匀。未用完的阳性对照可在2~8℃贮存1个月,长期贮存应分装存于-20℃。每次检测均至少一个阳性对照和一个阴性对照。空白对照:空气洗液的配制:1倍体积的洗液浓缩液(WASH BUFFER×25)加24倍体积的去离子水,当天用当天配。四、标本准备加入1ml样品稀释液至1.5ml 小离心管中,然后,加入0.1g固体粪便标本或0.1ml液体
(3M) 尿素、360g(6M) 加水至1L,过滤灭菌】 悬浮液【10mM Tris-HCL (pH7.6) ,1mM EDTA (pH8,0) ,0.5%SDS】 其余同上 操作步骤: 1:对于大量组织或细胞,则每克组织或细胞加入5-10ml氯化锂-尿素溶液,匀桨器高速匀桨2分钟;对于少量细胞(107个细胞/ml),则每克组织或细胞加入0.5ml氯化锂-尿素溶液手工匀桨,并转移至Eppendof管中 2:匀桨液在0-4℃放置4小时后,12000g离心30分钟 3:取沉淀,加入原匀桨液
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