- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL60205
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温(RNase需要4℃保存)
- 保质期：
一年
- 英文名：
Column Plasmid DNAOUT
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
50次/100次
柱式质粒 DNA提取试剂盒
编号：KL60205英文名：Column Plasmid DNAOUT
产品简介:
本试剂盒是用于质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理,再通过离心吸附柱,专一结合DNA,最后洗去杂质,高效快速提取质粒DNA,全*(代"套")操作可以在30分钟之内完成。
使用本试剂盒可从1-5 mL过了夜培养的菌液纯化得到高达20 μ g的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0),可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。
1.快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。
2.不需要预平衡离心吸附柱。
3.洗柱液即开即用,不需要额外加乙醇。
4.纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD比值在1.8-2.0之间。
5.产量高,每毫升过了夜培养的细菌可以提取到2-5μg/mL。
6.用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。
7.价格低,比多数国内同类产品的价格更便宜。
使用及效果:
在1.5 mL离心管收集1-4 mL过了夜培养饱和菌液,离心1分钟,用和0.25 mL溶液A重悬沉淀,再与0.25 mL溶液B混匀,再加入0.35 mL溶液C,混匀,室温静止2分钟,离心10分钟,将上清转移到DNA纯化柱中,静置2分钟,离心1分钟,弃收集管中的废液,加入0.5 mL的通用洗柱液,离心1分钟,弃废液,重复上一步1次。离心1分钟,甩干残留液体,将DNA纯化柱置于新的1.5 mL离心管(自备)中,加入适量(30—100 μL)DNA洗脱液离心即得质粒DNA。
运输及保存:
常温(RNase需要4℃保存),有效期一年。
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文献和实验声明：本公司网站上的说明书及产品资料均为北京思尔成生物技术有限公司独家制作，严禁转载作为商业用途。 Invitrogen DNA提取试剂盒使用说明书.pdf
1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
) 克隆困难怎么办？ 对于大片段载体构建实验而言，难点在于片段扩增效率低、重组 / 连接困难、质粒稳定性差、容易发生断裂等。需针对这些痛点，从技术路线选择、实验细节优化两方面制定策略，具体方案如下： ①建议首先选择「分段克隆 + 拼接」 策略，降低连接难度； ②大片段克隆的关键在于长片段的扩增，所以需要从源头保证实验成功率，即保证模板完整度，在扩增前确保模板未发生降解；其次优化 PCR 体系，比如选择长片段专用 PCR 酶，通过梯度测试选择最佳模板上样量及退火温度等； ③避免高拷贝载体（如 pUC
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