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人神经生长因子(NGF)ELISA检测试剂盒

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  • 2025年07月16日
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      上海乔羽生物科技有限公司

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    • 应用：

      实验

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    人神经生长因子(NGF)ELISA检测试剂盒上海乔羽生物科技销售！乔羽克有着多年elisa试剂盒的行业经验，代理不同系列的进口/国产elisa试剂盒，还供应生化试剂，抗体，培养基，血清血浆，染色液，实验耗材，标准品等，欢迎来电咨询！

    人神经生长因子(NGF)ELISA检测试剂盒标本的采集及保存:
    1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃ 后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
    2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
    3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
    注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
    人神经生长因子(NGF)ELISA检测试剂盒操作步骤：
    1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为120 U/L ，80 U/L，40 U/L，20 U/L，10 U/L）。
    2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
    3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
    4. 配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍）倍稀释后备用。
    5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。
    6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
    7. 温育：操作同3。
    8. 洗涤：操作同5。
    9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
    15 分钟.
    10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
    11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止
    液后15 分钟以内进行。
    注意事项：
    1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
    用完，板条应装入密封袋中保存。
    2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
    3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使排枪加样。
    4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计3算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
    5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
    6． 底物请避光保存。
    7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
    8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
    9． 本试剂不同批号组分不得混用。
    10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
    计算：
    以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，
    在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD
    值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释
    倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标
    准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值
    代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释
    倍数，即为样品的实际浓度。
    试剂盒性能：
    1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.990 以上。
    2.批内与批见应分别小于9%和11%
    检测范围：
    8 UL– 150 U/L
    保存条件及有效期：
    1.试剂盒保存：；2-8℃。
    2．有效期：6 个月

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