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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
ICE Tissue Stabilizer
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
100ml
冰冻动植物组织RNA稳定-过渡溶液
编号:KL0268英文名:ICE Tissue Stabilizer
本品是一种新型的冰冻组织过渡溶液,可以帮助解冻冰冻组织,同时保护RNA完整性,从而可以使冰冻组织转变到普通的匀浆方法易于处理的状态,以提取高质量的RNA。处理后的冰冻组织不需要在匀浆前将其碾磨成粉,甚至在匀浆前可以进一步对组织进行切割。加入RNAKeeper-ICE溶液后,组织从坚硬的冰冻状态转变为柔软状态,此时该溶液渗入组织,使RNA酶失活。用本品溶液处理后,组织可以在室温下操作而不用担心RNA会发生降解。而且,样品能被安全的称重,进一步切割,或者进行多种实验而不影响RNA的质量。处理后的组织样品可以直接加入到裂解溶液中破碎,也可以置于-20℃长期保存。
本产品适用于动物组织以及培养细胞、白细胞。经测试,可用于肝、肾、脾、肺、心、胸腺、胰等组织的保存。
本产品与基于异硫氰酸胍的RNA提取试剂如Total RNA Extraction Reagent, Trizol,或基于离心柱的RNA提取试剂盒兼容。
应用实例
1. 将本品在-70℃或-80℃预冷。
2. 样品保存:
A.动物组织:按100 mg组织比不小于1 ml 本品的比例,将冰冻组织浸没于预冷的本品中。注意:组织块的厚度应不超过0.5 cm,否则会影响本品的渗透效率,导致RNA稳定效果变差。
B.培养细胞、白细胞:收集细胞,用PBS清洗后加入至少10倍体积本品,盖紧管盖,上下颠倒数次。此时沉淀是否被完全悬浮对实验无影响。
3. 将浸没于本品的组织转移至-20℃存放。至少16小时后,组织即可匀浆进入后续提取过程;若不立即匀浆,组织可继续在-20℃稳定存放6个月。这个过程中,组织可从溶液中取出,在室温进行切割、称重等操作(注意在室温暴露的时间不要超过30分钟)后继续浸没在本品中保存。
4. RNA提取:将组织取出,用镊子轻轻挤掉多余的本品溶液,置于裂解液中,立刻匀浆。如果是细胞样品,10000g,4℃离心1分钟,弃上清,加入裂解液。
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文献和实验包埋以后,我们需要进行样本组织形态学检测和RNA 完整性检测。 组织形态学检测:冰冻切片,做普通 H&E 染色即可。主要观察组织形态上是否完整,比如是否有大的裂痕、冰晶形成而产生的气泡、褶皱等,在客户可以接受的范围之内。 RNA 完整性检测:收集冰冻切片10~20片,提取 RNA,跑2100检测。RNA RIN 值应大于7,即可进行空间转录组文库的构建。
样本采集和快速冷冻的时间。 2. 即时加入 RNA 稳定剂,使组织内的 RNase 失活及保护组织中的 RNA。 3. 快速匀浆,加入裂解液若粘稠至不能有效分层,可继续加入更多裂解液。 4. 采用 RNeasy Mini Kit(货号:74104)提取时,可将缓冲液 RLT 中加入的巯基乙醇含量提高至 3%-5%,能够有效改善结果。 血液样本 提取得到的 RNA 量少;由于 RNase 得到的 RNA 完整性较差,有降解;污染物包括抗凝剂-肝素和 EDTA,以及天然酶抑制剂影响下游 RNA
一、石蜡切片和冰冻切片的比较? 1、要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。 2、冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写
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