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TOYOPEARL®,多孔、半坚硬凝胶树脂系列,一般用做中压液相色谱填料,能在高流速下正常工作,最适应于制备分离及放大至工业纯化生产中,目前已广泛应用在生物高聚物和生物化学产品分离纯化领域。
HW型尺寸排除凝胶树脂
HW 树脂是由乙烯醇和甲基丙烯酸酯共聚而成的半坚硬球状体。树脂表面有许多羟基和醚键,羟基基团形成了许多官能团吸附点使之具有亲水性。它是一种大孔分子尺寸排除树脂,对蛋白质分离和未知生物分子的分子量估算非常有效。HW凝胶树脂克服了普通凝胶存在的不能适应高流速、高压,特别是不能适应极端的PH和盐溶液、有机溶剂等缺点。HW分为五种系列 HW-40、HW-50、HW-55、HW-65、HW-75。其中HW-65是Toyopearl 离子交换、疏水反应、亲合树脂的基体。
HW树脂的优点:
· 由于颗粒尺寸分布窄,因此具有高分辨率、锐谱峰的特点,能适应低浓度样品分离。
· 改善了多糖和糖蛋白的分离纯化
· 保证了蛋白质活性和质量高回收率
· 物理化学性质稳定
· 可以按比例放大到生产规模,重现性好
HW -40 性能
| Toyopearl
树脂型号
|
颗粒尺寸
(μm)
|
孔尺寸 Å
|
被分离的球蛋白分子量范围
|
| HW-40S
|
20-40
|
50
|
100-1000
|
| HW-40F
|
30-60
|
50
|
100-1000
|
| HW-40C
|
50-100
|
50
|
100-1000
|
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文献和实验纯化镍螯合树脂 用于分离 6XHis 标签重组蛋白,高度结合效率和低的非特异性结合。 固定的金属亲和层析树脂(IMAC)使用镍离子来纯化 6XHis 标签蛋白。树脂可以结合 6X 组氨酸残基(6XHis),一种在蛋白纯化中非常常用的标签。树脂由氨基二乙酸偶联到 6% 交联的琼脂糖上组成。氨基二乙酸可以共价结合到镍离子上,每毫升树脂可以结合 20-40μmoles 镍离子。 这种镍螯合树脂有单独的树脂也有离心柱形式供选择。 特定的结合和洗脱缓冲液液可以提供, 100 ml His 结合
,不能耐受压力。 薄壳型离子交换树脂:在玻璃微球上涂以薄层的离子交换树脂,这种树脂柱效高,当流动相成分发生变化时,不会膨胀或压缩;缺点是但柱子容量小,进样量不宜太多。 ③离子交换色谱法的应用 主要用来分离离子或可离解的化合物,凡是在流动相中能够电离的物质都可以用离子交换色谱法进行分离。 广泛地应用于:无机离子、有机化合物和生物物质(如氨基酸、核酸、蛋白质等)的分离。 4.凝肤色谱法(空间排阻色谱法) 凝胶是一种多孔性的高分子聚合体,表面布满孔隙,能被流动相浸润,吸附性很小。凝胶
基酸氨基酸为两性化合物,含有可形成正离子的氨 基和可形成负离子的羧基。因此,应用阳离子交换树脂和阴离子交换树脂均可对其进行分离和纯化。天然氨基酸主要来源于蛋白质水解液或微生物发酵液,随其来源不同,体系中氨基酸的含量与半生杂质的类型也有所区别,因而提取分离工艺也不尽相同。用于离子交换树脂从蛋白质水解液中提取分离氨基酸的工艺如下图: 而自然界中尚存在大量的非蛋白氨酸,具有药用价值的就有40余种。如美舌藻中的海人草酸、使君子种子中的使君子氨酸和南瓜子中的南瓜子氨酸,均具有驱蛔虫作用的中草药有效成分,均可用温水
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