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- 技术资料
- 保存条件:
4℃避光保存
- 保质期:
有效期6周
- 英文名:
Human DiI-LDL
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
500μg
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 保存 | 价格(元) |
| Human DiI-LDL红色荧光标记人源低密度脂蛋白 | 20614ES76 | 500µg | 4ºC避光 | 2255.00 |
产品描述
低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,简称为LDL)是通过脂蛋白酯酶的水解作用,脱去极低密度脂蛋白(VLDL)中的甘油三脂,释放游离脂肪酸转化而来的。因甘油三酯的去除使得胆固醇所占比例提高,增加颗粒本身密度,从而得到LDL。LDL与脊椎细胞表面的受体特异性结合,然后通过受体介导的内吞作用将胆固醇运输到全身各处细胞。因此,LDL可以用来研究受体介导的内吞作用过程,尤其是在动脉粥样硬化等疾病中,血浆来源的LDL还可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。
红色荧光标记人源低密度脂蛋白(Human DiI-LDL)是标记荧光探针Dil(1,1-dioctadecyl-3,3,3,3- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)的LDL,可以用来观察培养细胞的LDL结合位点,或筛选LDL受体表达缺陷型细胞突变株。也可以通过流式细胞术评估细胞受体水平,或检测组织内的受体水平。 DiI-LDL是研究细胞内吞作用非常好的标记物。
翊圣提供的Human DiI-LDL为无菌包装,可以直接稀释使用。除提供DiI-LDL,我们还提供不带标记的LDL,以及修饰化的LDL如乙酰化LDL(Ac-LDL),以及氧化修饰的LDL(Ox-LDL)。
制备方法
纯化的人健康血浆来源的LDL直接标记上DiI荧光探针,然后通过超速离心以及透析的方法纯化回收标记产物,并滤膜过滤除菌。纯化的DiI-LDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS,pH 7.4中。
产品性质
| 浓度(Concentration) | 0.8-3.0 mg/ml |
| 外观(Appearance) | 乳状液体 |
| 吸光度比例(Absorbance Ratio) | Dil/Protein=555nm/275nm=1.30 |
| 缓冲液组分(Buffer Components) | 0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4 |
运输与保存方法
冰袋运输;
4ºC无菌避光,收到货后可稳定保存6周。千万不可冻存!使用时一定要无菌操作!
注意事项
- 本品的稀释工作液极不稳定,建议即配即用;
- 长期贮存可能会有沉淀析出,属于正常现象,低速离心2 min去除沉淀即可使用;
- LDL与LDL受体的结合需要Ca2+和Mn2+的参与,过量EDTA的存在会抑制其结合;
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 无菌条件下,将DiI-LDL用细胞培养基稀释至25-50 µg/ml。
- 加入活细胞内,37℃培养4-5小时。
- 孵育结束,吸去含有Human DiI-Ox-LDL的培养基,并用无探针的培养基洗几次。
- 根据实验需求用荧光显微镜或流式细胞仪检测。
- 荧光显微镜观察
- ) 细胞分选(流式细胞术)
- EDTA制成单细胞悬液,选用合适的已标记纯化细胞用作阴性和阳性对照,从而进行流式分选设门(gate)。(建议使用波长为Ex: 488/514/549nm; Em: 565nm)。
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文献和实验佚名 图5-6 细胞对LDL的摄取和降解 LDL由VLDL转变而来,LDL中主要脂类是胆固醇及其酯,载脂蛋白为apoB100。 LDL在血中可被肝及肝外组织细胞表面存在的apoB100受体识别,通过此受体介导,吞入细胞内,与溶酶体融合,胆固醇酯水解为胆固醇及脂肪酸。这种胆固醇除可参与细胞生物膜的生成之外,还对细胞内胆固醇的代谢具有重要
主要分为两大类,第一类是 PKH67(绿色荧光)/PKH26(红色荧光),由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合,所以染色效果较好,应用较广泛。 图1 PKH67 标记的外泌体与神经元之间相互作用 Acta Neuropathol Commun. 2018 Feb 15;6(1):10. 图2 PKH26 标记的外泌体与 MDA‐MB‐231 细胞共培养 Cancer Sci. 2019 Oct;110(10):3173-3182. 第二类是 Di 系列的亲脂性染料,包括DiI(橙色荧
Isolation of LDL(Low Density Lipoprotein) From Human Plasma:
This procedure involves use of human plasma, a potentially dangerous source of blood-borne disease. Wear long-cuffed gloves, and eye-protection. Day one: -Human Plasma is purchased from the Red-Cross. It should be 3-4 days old











