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文献和实验血清热灭活�您是否在浪费时间? 血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题,价格不菲的血清中含有诸如生长因子,维生素,氨基酸等珍贵物质,而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。尽管如此,在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行,多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子,氨基酸等成分带来的负面影响,在我们的技术热线中最常被提到的就是否该对血清进行热灭活,下面我们就对胎牛血清的热灭活进行一些探讨和解释。 根据调查,至少70%的研究者对血清的灭活仅仅
低血清的溶血。 国产血清的采血点很分散,大多是由屠户采血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。 进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。 总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量的呈现出谈黄、微红色,如Gibco 16000,差点的呈现出橘红色或鲜红色。 当然,热灭活血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。 2、沉淀
胎牛血清是细胞的 “一日三餐”,从实验室传承下来的经典操作 ——56℃水浴 30 分钟热灭活,曾是绝大多数人的标配步骤。 可随着血清生产工艺迭代升级、原料筛选标准提升,这套祖·传操作早已不再适用所有细胞,盲目灭活反倒成为细胞长势差、实验重复不稳的隐形隐患。 一、血清热灭活,最初是为了解决什么? 热灭活的核心目的:高温灭活血清中的补体成分。 早年血清提纯工艺简陋,血清内补体含量偏高,补体激活后会损伤细胞膜,造成免疫类细胞裂解、抱团死亡。在没有精细化筛选血清的年代,56℃、30min 灭活是降低
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