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文献和实验表达,如扩增标志基因谷氨酰胺合成酶GS,可被MSX(L-methionine sulphosimine)所抑制,GS显性选择标志可在多种类型细胞中表达,通过大剂量一次性筛选,可获得高拷贝扩增。扩增标志基因可分别位于重、轻链载体上,通过共转染来获得抗体,也可将重、轻链串联于一个表达载体上,此时基因顺序很重要,因为下游启动子可被上游启动子通读而产生闭合现象。 2.大肠杆菌中表达 大肠杆菌虽没有糖基化修饰的功能,但是,现在已经证实表达的抗体片段如Fab、ScFv、VH能正确折叠及装配成具有
1000kb不等。即使是同一种细胞,选择过程不同,基因扩增的范围也不同。 然而,出现了更有效的扩增系统—GS扩增系统——GS(谷氨酰胺合成酶)扩增系统是新近发展的更有效的系统,具有更高的扩增效率。 这是为什么? 谷氨酰胺合成酶在ATP水解提供能量时,利用细胞内的氨和谷氨酸合成谷氨酰胺,在缺乏细胞外谷氨酰胺的培养条件下,加入谷氨酰胺合成酶抑制剂甲硫氨酸亚砜(MSX),可使GS 基因及与之相连的目的基因扩增,达到提高目的基因表达水平的目的,由于只有多拷贝的GS 编码基因才能抗MSX
Mg。原子量 24.3。是所有动物、植物不可缺少的元素。在植物中它是叶绿素的主要金属成分,如果缺镁,绿色植物就发生白化。非绿植物绝缺镁也同样是不行的。在高等植物中,镁是存在叶片里,特别是积存在脂肪种子中,无隔藻属缺镁时,一般细胞内油滴的形成消失,所以推测它与脂肪的代谢有关。对已糖激酶等磷酸转移酶、三磷酸腺苷酶等磷酸酶,以及谷氨酰胺合成酶等各种酶的活化,镁也是不可缺少的,也有人认为酶的主体是镁蛋白。镁在动物体内也广泛存在,在人体作为组成元素镁占第 11位(占体重的 0.05%)。是从食物中
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