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上海笃玛生物科技有限公司
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100T
L-γ-谷氨酰胺转移酶(GGT或GT)是催化γ-谷氨酰基胺移换反应的酶,γ-谷氨酰基从谷胱甘肽或其他含γ-谷氨酰基物质中转移到另一肽或氨基酸分子上。GGT主要存在与肝细胞膜和微粒体上,参与谷胱甘肽的代谢,血清中主要来自肝胆系统,当肝内合成亢进或胆汁排出受阻时,血清中GGT往往容易增高。
γ-谷氨酰胺转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法)以萘胺盐为底物,在GGT催化下,γ-谷氨酰基转移到甘肽分子上,同时释放出游离的α-萘胺,后者与重氮盐的反应,产生红色化合物,其颜色深浅与GGT浓度呈正比,通过酶标仪检测530nm处吸光度,进而计算酶的活性。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途.
γ-谷氨酰胺转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法)
操作步骤(仅供参考):
- 准备样品:
‚细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-20℃保存,用于GGT的检测。
ƒ(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的GGT含量。
- 配制GGT显色工作液: 取GGT显色剂1支,加入显色稀释液12.5ml,混匀,即为GGT显色储存液。临用前,取适量GGT显色储存液,按GGT显色储存液:显色稀释液=1:9的比例混合,即为GGT显色工作液。4℃保存,24h有效。
- 制作GGT标准曲线:取适量的萘胺标准(1.5mmol/L),按萘胺标准(1.5mmol/L):GGT assay buffer=1:9的比例混合,即为萘胺标准工作液-萘胺标准(0.15mol/L),按下表制备标准曲线。
γ-谷氨酰胺转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法)
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γ-谷氨酰胺转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法)
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文献和实验γ-谷氨酰基转移酶(GGT)分布于肾脏、肝脏、胰腺等实质脏器;肝脏中,GGT主要局限于毛细胆管和肝细胞的微粒体中,可用于对占位性肝病,肝实质损伤(慢性肝炎、肝硬变)的诊断及观察乙醇损害的过程。 参考值: 男性 <49 U/L; 女性 <32 U/L; GGT升高主要见于: 1 传染性肝炎,肝硬化,胰腺炎等常轻中度增高
测定的局限性及干扰因素 1.本法具有较好的灵敏度和准确性,先后作为AACC和SSCC的推荐方法,该底物的溶解度小,难以达到酶动力学反应的最适浓度,只能采用较低的基质浓度;甘氨酸对GGT的反应有抑制作用,所用的双甘肽制剂中不应含有甘氨酸; 2.试剂中的游离对硝基苯胺和其他不纯的物质对酶活性有抑制作用,可用吡啶抽提不纯物质,如果试剂空白过高,底物应该重新结晶; 3.甘氨酸对GGT的反应有抑制作用,所用的双甘肽制剂中不应含有甘氨酸; 质量控制 每批
疫性疾病的病理学提供重要见解。 新的药物靶点和治疗策略。一旦发现失衡,就可以开发药物来影响这些酶的活性并纠正失衡,为 医学上至今难以攻克的疾病提供新的治疗策略。例如,许多 HDAC 抑制剂正在开发中,作为对抗 癌症和炎症性疾病(如关节炎和 I 型糖尿病)的新型药物。 对于药物开发活动,根据对 writers 和 erasers 活性的影响,很容易筛选到相应的化合物。 表征组蛋白甲基化通路 一般来说,开发组蛋白甲基转移酶 (HMT) 检测试剂盒充满挑战;大多数检测试剂盒存在几个缺点,原 因出
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