人血管紧张素转化酶 (ACE)酶联免疫试剂盒

人血管紧张素转化酶 (ACE)酶联免疫试剂盒
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人ACE抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人ACE会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ACE抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人ACE抗体与结合在包被抗体上的人ACE结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，ACE浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中ACE的浓度。

本产品适用于体外定量检测人血清、血浆或其它相关生物液体中天然和重组ACE浓度

*: [96T/48T]（打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整）
#: 一周内使用可存于4℃，需长时间存放或多次使用建议存于-20℃.
相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出！

人血管紧张素转化酶 (ACE)酶联免疫试剂盒
试验所需自备物品:
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3. 37℃恒温箱，双蒸水或去离子水
4. 吸水纸

检测前准备工作:
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可用40℃水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤液（加热温度不要超过50℃，使用时洗涤液应为室温）。当日使用。
3. 标准品: 于10000×g离心1分钟，加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中，旋紧管盖，静置10分钟，上下颠倒数次，待其充分溶解后，用移液器将其轻轻混匀（浓度为50ng/mL）。然后根据需要进行倍比稀释（注：不要直接在反应孔中进行倍比稀释）。建议配制成以下浓度：50、25、12.5、6.25、3.125、1.563、0.781、0ng/mL，标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制25ng/mL标准品：取0.5mL50ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中，混匀即可，其余浓度依此类推。
6th Edition, revised in June, 2014
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人血管紧张素转化酶 (ACE)酶联免疫试剂盒
4. 生物素化抗体工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
5. 酶结合物工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。当日使用。

结果判断:
1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图，如设置复孔，则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标，标准品的浓度为纵坐标，绘出标准曲线。
2. 推荐使用专业的曲线制作软件，如curve expert 1.3或1.4，在软件界面既可根据样品OD值，由标准曲线查出相应的浓度，乘以稀释倍数；亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
3. 若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。

灵敏度、检测范围、特异性和重复性:
●灵敏度：最小可测0.469ng/mL。
●检测范围：0.781–50ng/mL。
● 特异性：可检测重组或天然的人ACE，且与其它相关蛋白无交叉反应。
● 重复性：板内，板间变异系数均<10%。

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