- ¥1000
- ATCC
- 美国
- AT1097
- 2025年07月13日
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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
1年
- 英文名：
BL21-SI
- 库存：
20
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
500ul甘油菌
基本信息
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 菌株类型: | E.coli |
| 培养基: | LB培养基 |
| 生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
| 基因型: | F- ompT hsdSB(rB-, mB-) gal dcm endA1 lon- proUp::T7 RNAP::malQ-lacZ (TetS) |
| 抗性: | 四环素 |
| 质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
| 应用: | 蛋白表达 |
| 诱导方法: | IPTG |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| AT1097 | BL21-SI | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
BL21-SI是 lon和ompT蛋白酶缺陷型型菌株。
BL21-SI感受态细胞是用于蛋白质表达的宿主菌株。
1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。
3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
特别注意事项：
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时与我司销售联系或更换新的菌种。
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文献和实验本月旧帖整理活动专题: T-A克隆技术 大家可以在以下基础上进行整理或对具体问题进行讨论 (1)如何筛选合适的宿主菌株 ◇ 所选的宿主菌株应对所用质粒的抗生素抗性基因敏感。 ◇ 如进行蓝/白斑筛选，宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽编码区应在染色体或附加体上缺失掉（lacZΔΜ15）。TOP10和DH5α都能用于蓝/白斑筛选。 ◇ 要表达重组蛋白，可使用带有可诱导的T7 RNA聚合酶基因的菌株，如BL21（DE3）。 ◇ 使用pGEM载体克隆大片段时（>7-8 kb），经转化
的宿主菌基因型，并使细胞生长加快（当天获得菌落），已经成功应用于25kb超螺旋DNA和8kb连接DNA的克隆。XL10-Gold®，BL21-Gold，BL21-CodonPlus®，SoloPack® Gold 和96Pack® Gold等系列细胞都带有这个新的性状。超级感受态细胞 Stratagene提供多种>5 x 109 转化子/μg 超螺旋DNA转化效率的化学法超级感受态细胞正是克隆获得大质粒、连接DNA克隆和建库时最值得推荐的。电转化感受态细胞 Stratagene
一步法感受态细胞制作 （已经检验过DH5α和BL21系菌，采用此方法的转化效率足够高）来自Nucleic Acid Research 1988 16 3580Rapid and Convenient method for the preparation and storage of competent bacterial cells.Chung CT, Miller RH.1. LB medium 培养至 OD值 0.3-0.5。2. 4℃ 3000g（或6000rpm） 5分钟。弃上清
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