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大鼠瘦素试剂盒(酶免法)

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  • 2026年01月07日
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      大量

    • 供应商

      深圳市科润达生物工程有限公司

    • 检测范围

      科研

    • 检测方法

      酶联免疫法

    • 应用

      用于大鼠血清,EDTA-血浆和细胞上清中瘦素的定量检测

    • 适应物种

      大鼠

    • 标记物

      瘦素

    • 样本

      大鼠血清,EDTA-血浆和细胞上清

    • 规格

      96T

    大鼠瘦素酶免试验
    (日本IBL 27295)
    简介
    1950年发现隐性肥胖基因突变导致肥胖,且与二型糖尿病综合征的病态肥胖类似。1994年在洛克菲勒大学Freidman团队发现肥胖基因编码形成瘦素。瘦素是由肥胖基因产生的16KDa的分泌型蛋白。脂肪组织产生瘦素并释放至血液中,随着脂肪的累积,血液中瘦素的水平含量也呈增长趋势。瘦素作为lipostat,随着脂肪组织内脂肪的沉积而增加;它还可作为一激素,指令大脑终止食物的消化和增加活动;还证明了可用于标记和控制青春期的开始;另外,近期研究表明,瘦素可通过中枢神经系统抑制骨形成。
    实验原理
    此试剂盒是一种夹心法的ELISA试剂盒,使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂,最终溶液所显示的颜色强度与样品中瘦素的量成正比
    检测范围
    56.25~3600pg/mL
    预期用途
    此试剂盒用于大鼠血清,EDTA-血浆和细胞上清中瘦素的定量检测
    试剂盒组成
    • 微孔板,96T,包被有抗大鼠瘦素兔子IgG抗体,亲和纯化
    • 标记抗体浓缩,30X,0.4ml,HRP标记的抗大鼠瘦素兔IgG Fab片段
    • 标准品,0.5ml,2支,大鼠瘦素
    • EIA缓冲液,30ml,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS
    • 标记抗体稀释液,12ml,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS
    • 着色剂,TMB,15ml
    • 终止液,1N硫酸,12ml
    • 洗涤缓冲浓缩液,40X,50ml,0.005%吐温20的磷酸缓冲液
    准备步骤
    试验所需材料但试剂盒未提供
    • 酶标仪(450nm)
    • 带刻度的量筒与烧杯
    • 孵箱(37℃±1℃)
    • 吸水纸
    • 稀释试管
    • 微量移液器和取样吸头
    • 去离子水
    • 坐标纸(log/log)
    • 用于稀释标准品的试管
    • 洗涤瓶

    试剂准备
    • 洗涤缓冲液制备:先将洗涤浓缩液平衡至室温,充分混匀,然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀,即得。配制的洗涤液应保存于冰箱内,并于2周内用完
    • 标记抗体的制备:用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍,即得。
    例:如果只测一条板,8孔,则需要标记抗体800ul(30ul的标记抗体+870ul的标记抗体稀释液,混匀,使用时每孔加100ul)
    此步骤在实验开始前完成
    剩余的标记抗体浓缩应装于密封瓶内,保存在4℃
    • 标准品的制备:吸取0.5ml的去离子水至标准品瓶内,充分混匀,得到7200pg/ml的大鼠瘦素标准品
    • 标准品的稀释:准备8个试管用于标准品的稀释,每管加入230ul的EIA缓冲液
    每管的浓度如下
    1号管 3600pg/ml
    2号管 1800pg/ml
    3号管 900pg/ml
    4号管 450pg/ml
    5号管 225pg/ml
    6号管 112.5pg/ml
    7号管 56.25pg/ml
    8号管 0pg/ml(试验样品空白)
    吸取230ul的标准品于1号管混匀,然后从1号管吸取230ul加入2号管,依次连续稀释,标准品范围为3600~56.25pg/ml
    • 样品稀释:样品用EIA缓冲液稀释。如果样品浓度事先没有估计,我们建议,先用几个不同稀释比例的样品进行检测,来确定样品最佳稀释比例

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