辣根过氧化物酶(HRP)标记套装现货价格

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辣根过氧化物酶(HRP)标记套装现货价格的品牌：百奥莱博，是优质的细胞及免疫学产品，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多辣根过氧化物酶(HRP)标记套装等细胞及免疫学产品请联系我司咨询订购。

名称：辣根过氧化物酶(HRP)标记套装现货价格
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：一套
保存条件：HRP（辣根过氧化物酶）-20度保存，透析袋2－8度处理。其他常温保存。
产品说明：本套装是将HRP标记的常用试剂集合为一体而成。本操作流程为经碘的高碘酸氧化法。适合于蛋白等含有氨基物质的标记。特别是抗体的标记。
如果待标记物分子量太小（如小于15KD），可能会穿过透析袋而造成样品损失。
标记原理：在低PH下使RP经NaIO４氧化后形成的醛基可蛋白等分子的氨基相连，形成斯夫氏硷，后者可进一步用NaBH４还原生成稳定的酶标记物。
操作方法：
一， 标记量的计算：HRP（辣根过氧化物酶）分子量为40KD左右。一般为HRP：待标记物＝2：1到4：1之间。比如抗体IgG分子量一般为150－160KD。则10mg HRP可标记抗体在10mg-20mg之间。
二， 计算好各步反应时间。作好开始标记的准备工作，最好是从下午开始。将HRP（辣根过氧化物酶）一共10mg加入1ml双蒸水溶解。溶解后可放－20度存放一个月。如果想作两次标记，可适当称量5mg。但并不推荐称量更小的质量。以免产生更大误差。而且透析袋一般也只够两次用量。
三， 剪切合适长度透析袋，用双蒸水清洗三次备用。透析袋分宽窄两种，适合于不同量样品的透析，请自己安排。称取21.3mg NaIO４，加入0.5ml双蒸水溶解(现配现用，浓度为0.2M)，将100mM乙酸钠（PH4.4）用双蒸水稀释100倍成1mM乙酸钠（PH4.4）。准备待标记物，如果待标记物本身盐含量很低并且缓冲力差，如生理盐水，可等二天再准备。如果不确定，将0.2M PH9.5 CB稀释20倍（请不要一次稀释完，留1－2ml左右备用），作为透析液，将待标记物装入透析袋中4℃透析过夜，透析袋适当留长约2ml体积的量以备第二天加入酶（透析袋使用请见附录）。
四， 以一次标记完为例，如果标记量小，可按比例减小试剂的用量。取0.2ml现配的NaIO４溶液加入HRP溶液中，混匀，避光常温反应两小时。装入透析袋中，在稀释过的乙酸钠（PH4.4）溶液中4℃透析过夜（透析袋使用请见附录）。
五， 第二天早上，如果样品为固体，可用水溶解，加入1/20体积的0.2M PH9.5 CB，混匀。取出活化好的HRP装入一适合离心管中，加入50ul 0.2M PH9.5 CB，混匀，立刻加入待标记物中，混匀。避光常温反应两小时。
六， 加0.1ml新配的10mg／ml NaBH４液，混匀，常温半小时。
七， 配制合适的透析液，如生理盐水或者PBS等。透析酶标记物。
八， 如果有条件进一步纯化，可透析半天后去进一步纯化，如果不纯化，请在4℃透析至少24小时。勤换液。

附透析袋使用方法：
本透析袋已预处理过，用双蒸水清洗后将水用适当吸一下。就可直接使用。透析袋上下都可以用铁夹，但如果铁夹不够用，下部可用细线或者其他的透析袋夹。
将透析袋轻轻的折上两到三折。用线或者透析袋夹封住，上面支开，加入待透析物，留一定量的空气在顶上，并小心的折一折，用铁夹夹住，轻轻的挤压，如没发现有液体流出，可放入透析液中。一般透析可用纯净水瓶去顶使用。用一次性筷子或者其他合适物穿过铁夹，将透析袋吊在透析液中，补充透析液，使透析液盖过透析袋中的液面而不要淹过铁夹下面。

我公司的辣根过氧化物酶(HRP)标记套装现货价格，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销售下列产品：

·动物线粒体DNA提取试剂盒
编号：XH001
规格：50T/100T
储存条件：2～8℃，有效期一年。使用前，在DNA酶I中加入600ul（50T）或者1100ul（100T）的DNA酶反应液，分装后-20度保存。线粒体裂解液使用前常温保存，如有沉淀可37度水浴溶解，不影响使用。
三，说明
线粒体DNA提取的关键是尽可能的去掉核DNA。本试剂盒利用差速离心到比较纯净的线粒体，再利用DNA酶消化裂解缓冲系统等多步骤去掉核DNA，最后得到纯净的线粒体DNA。可用于PCR等对纯度要求较高的实验。
本试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织（肝或脑组织）和硬组织（肌肉）以及培养细胞线粒体DNA的提取制备。不适合植物及其他标本的提取。
四，操作步骤
准备工作：在DNA酶I中加入600ul（50T）或者1100ul（100T）的DNA酶反应液，适当分装后-20度保存。线粒体裂解液保存于常温，如有沉淀37℃水浴溶解，离心机温度下降到4℃（2-8℃），如无低温离心机，也可以常温离心，并将离心时间为10min的改为5min，但最后所得DNA品质及产量可能会有一定影响。
1. 样本处理
a. 组织匀浆：称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨组织20次；
b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 × g 5~10 min离心收集细胞。计数。每次提取需要5 × 107个细胞，加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨30~40次；
2. 将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4℃，1000× g 离心5 min；
3. 取上清，加入一新的离心管中，4℃，1000× g 再次离心5 min。
4．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 12,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底；
5. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀，4℃，1000× g 离心5 min；
6．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 12,000 × g 离心10 min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底；
7. 加入100ul DNA酶反应液重悬线粒体，吹打均匀后，再加入10ul DNA酶I溶液（见准备工作），混匀，37度水浴10min。此步为消化线粒体表面吸付的核DNA。4℃， 12,000 × g 离心5 min。尽可能的弃上清，再加入200ul TE 重悬线粒体沉淀，离心，洗去残留的DNA酶。
8.得到的沉淀，用100ul TE 重悬线粒体沉淀。加入200ul线粒体裂解液，轻轻混匀（不可吹打），放置2min左右，不超过5min，再加入150ul蛋白沉淀液，迅速混匀。4℃， 12,000 × g 离心5 min。此步骤可进一步去除核DNA。
9．取上清，加入一新的离心管中（可选用等体积的酚氯*(代"仿")异戊醇25:24:1抽提一次，再用氯*(代"仿")抽提一次，或者直接用氯*(代"仿")抽提两次，一般来说，此步可省，并不影响后续的PCR），加入0.6倍体积的异丙醇（如无异丙醇，可加入2.5倍体积的乙醇沉淀DNA）及10ul 核酸核酸助沉剂，混匀，-20℃沉淀半小时左右（此步可省），4℃， 12,000 × g 离心10 min。
10. 弃上清，再加入1ml 70%乙醇，4℃， 12,000 × g 离心10 min。重复用70%乙醇洗一次。
11. 弃上清后再次离心1min 吸弃上清，开盖凉干约5-10分钟。
12．加入20-30ul TE缓冲液,轻弹管底，37度水浴5分钟，线粒体DNA溶解。
13. 进行DNA电泳检测及-20度保存，进行下步的实验。
四 注意事项：
1. 为保证获得完整及尽可能多的线粒体，匀浆条件要示：第一是全程低温操作。第二是快速。第三，如用条件可将匀浆后的碎片在显微镜下观察。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2．线粒体DNA本身含量很低，如果电泳检测不到，可加大上样量，用更少量的TE溶解沉淀，或者直接进入PCR检测。
2. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。

一般低温度心机都有离心力显示，如果没有，可以用以下公式简单的换算。
转速与离心力换算
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２
G为离心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍数来表示；
[rpm] ２即：转速的平方； R为半径，单位为厘米。


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·DH5α受体菌
编号：XH042
规格：1ml
基因型：F-,φ80dlacZ△M15, △(lacZYA-argF)U169, deoR, recA1, endA1, hsdR17(rk-,mk+ ), phoA, supE44, λ-, thi-1, gyrA96, relA1

细胞种类
α-互补性选择宿主 E.coli DH5α
E.coli DH5α在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时，由于载体DNA产生的LacZα多肽和DH5α编码的lacZ△M15相结合，从而显示β-半乳糖苷酶活性（α-互补性）。利用这一特性，可以很容易鉴别重组体菌株。DH5α可以用于制作基因库、进行亚克隆等，由于DH5α具有decR变异，可以作为较大质粒的宿主菌使用。
保存：所有受体菌均为甘油保存，-70℃可长期保存，-20℃可保存一年。

·TOP10受体菌
编号：XH045
规格：1ml
基因型：F-，supE44，hsdS20(rB－mB－)，recA13，ara-14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1
细胞种类
高效常用宿主菌E.coli HB101
E.coli HB101在基因重组实验起始时便十分常用。遗传性能稳定，使用十分方便，适合于各种基因重组实验。
保存：所有受体菌均为甘油保存，-70℃可长期保存，-20℃可保存一年。


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·羊抗人IgG（纯化抗体）
编号：XH095
规格：1mg/10mg
先以A蛋白从正常人血清中纯化免疫球蛋白人IgG，用此人IgG免疫山羊，经过多次免疫后，测得山羊血清的效价达到要求后，动脉一次取血，静置得到血清，血清采用DEAE离子交换吸掉杂蛋白，再用硫酸铵沉淀，透析，定量等进一步处理得到纯化羊抗人IgG抗体，此纯化抗体可以用于标记，免疫沉淀，ELISA等常规免疫学实验。
如果客户对抗体纯度要求更高，本公司可以定做免疫亲和纯化的抗体，以人IgG结合在树脂上，吸附全部有活性的抗体，这样得到的抗体纯度更高，当然，成本也更高。

·PCR试剂盒（教学用）
编号：XH049
规格：50T/500T
常规PCR发展到如今已经是非常成熟，对于大多数的科研人员来说，买TAQ酶和dNTP就可以，而如果为省事，可以直接买PCR MasterMix。而本试剂盒从PCR的原理来让学生学会PCR。本试剂盒带有模板和引物，可以产生500bp的单一条带。
试剂盒组成：
试剂盒组成
50次
500次
储存条件
Taq Polymerase(5U/ul)
50ul
500ul
-20℃
10×PCR Buffer
1ml
5ml
-20℃
MgCl2(25mM)
1ml
5ml
-20℃
模板（1ng/ul）
100ul
1ml
-20℃
上游引物(10mM)
100ul
1ml
-20℃
下游引物(10mM)
100ul
1ml
-20℃
ddH2O（PCR用）
2ml
25ml
-20℃
6×DNA Lodding Buffer
1ml
1ml
-20℃
500bp对照（50ng/ul）
100ul
1ml
-20℃
说明书
1份
1份
RT
保存说明：10×PCR Buffer、MgCl2(25mM)、ddH2O（PCR用）在2-8℃保存一个月对实验无影响，500bp对照、模板和引物在2-8℃保存一周对实验无影响。微量试剂打盖前请离心。
自备试剂：琼脂糖，电泳缓冲液，核酸染料（如EB，goldveiw等）
操作步骤：
按照下面的量加入试剂：可一次配50ul，或者一次配更多的量，如500ul，混匀再分成50ul一管。一般Taq Polymerase最后加入。
加入试剂
加入量总50ul
加入量500ul
ddH2O（PCR用）
37ul
370ul
10×PCR Buffer
5ul
50ul
MgCl2(25mM)
4ul
40ul
模板（1ng/ul）
2ul
20ul
上游引物(10mM)
2ul
20ul
下游引物(10mM)
2ul
20ul
Taq Polymerase(5U/ul)
1ul
10ul
总体积
50ul
500ul
混匀。
按照下面的条件设置反应
温度
时间
循环次数
94℃预变性
3min
1 cycles
94℃变性
30sec
30 cycles
54℃退火
30sec
72℃延伸
500-2000bp/1min
72℃终延伸
5min
1 cycles
反应完降温到25℃
反应完后，取5ul产物，加入1ul 6×DNA Lodding Buffer 混匀电泳检测。可同时在两测跑一个500bp的对照。（1.5%的胶可以得到理想的结果）

北京百莱博科技有限公司专业生产细胞及免疫学产品，欢迎来电咨询选购辣根过氧化物酶(HRP)标记套装现货价格。