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文献和实验【共享】如何检测GFP、GFP、YFP、EYFP、CFP抗体?
检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗体GFP是绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein)的简称,由238个氨基酸残基组成。GFP蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。GFP或其突变体EGFP标签系统等被广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分布。我们都知道GFP抗体能应用于GFP的表达检测、纯化
,鼠单抗已从单纯的生物实验室科研及临床诊断发展到治疗性抗体药物。目前的抗体药物大多来源于小鼠或噬菌体展示库。2019 年 3 月,首个骆驼源纳米抗体 Cablivi 获得 FDA 批准上市。2019 年 10 月,迎来首个兔单抗药物 Beovu,是抗体药物发展历程中的一个里程碑。临床使用的大多数治疗用抗体均需进行体外亲和力成熟,以提高抗体的亲和力。这一过程耗时长(8-12 个月),最终亲和力在 10-9mol/L。而兔单抗不需经体外亲和力成熟,就能达到 10-11 至 10-13mol/L。另外,兔
、三杂交系统和反向杂交系统等。Angermayr等设计了一个SOS蛋白介导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能,丰富了酵母双杂交系统的功能。此外,酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。二、噬茵体展示技术在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的DNA序列,当噬菌体生长时,表面就表达出相应的单抗,再将噬菌体过柱,柱上若含目的蛋白,就会与相应抗体特异性结合,这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用,不仅有高通量及简便的特点,还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混合
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