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赫澎(上海)生物
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文献和实验一、实验目的通过对好气性自生固氮菌的计数,了解稀释培养计数(MPN)的原理和方法。二、实验原理最大或然数(most probable number,MPN)计数又称稀释培养计数,适用于测定在一个混杂的微生物群落中虽不占优势,但却具有特殊生理功能的类群。其特点是利用待测微生物的特殊生理功能的选择性来摆脱其他微生物类群的干扰,并通过该生理功能的表现来判断该类群微生物的存在和丰度。本法特别适合于测定土壤微生物中的特定生理群(如氨化、硝化、纤维素分解、固氮、硫化和反硫化细菌等。见附表23-1)的数量
。DNA 的一级结构不稳定,会因为水解、非酶甲基化、氧化损伤和酶降解等出现降解。 细胞中存在核酸酶,如果核酸酶处理不干净,残留在纯化的核酸样本中,从而降解靶核酸。微生物如细菌产生的限制性内切酶也会是一个降解 DNA 的因素。有些细菌的 DNA 酶属于热稳定的核酸酶,在扩增中期可水解基因组和引物 DNA。 核酸和引物也因为其不能与 DNA 聚合酶结合而出现不扩增。如蛋白质、多糖、细胞碎片、脂类等对 PCR 的抑制作用,很可能就是通过对 DNA 的物理包裹作用而使其不能与聚合酶接触。 乳胶
纤维素酶 cellulase 催化纤维素水解的酶( EC3. 2. 1. 4).发现于高等植物的芽、青霉、酵母、菌或木材腐朽菌那种霉菌和许多土壤细菌。此酶还存在于牛胃等高等动物的消化道内,这是由于栖息在消化道内的原生动物以及其他微生物产生的。在低等动物中,蜗牛的胃液和凿船贝的消化盲囊等的消化液中含有自己产生的酶。又已知在某些昆虫( Macrotoma的一种等)也有同样的纤维素酶。许多木材穿孔性昆虫及其幼虫的消化道内存在着许多微生物(例如:白蚁的 Trichonym- pha
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