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文献和实验相关专题 1.G418的配制 : 方案一: 300mgG418加入3ml PBS 溶液,浓度为100mg/ml,完全溶解后,0.22um 过滤,-20℃保存。 方案二:(1)配制1M HEPES:23.8g HEPES(缓冲能力更强)粉末溶于100ml ddH2O,10N NaOH(加量较多)调节pH至7.3,过滤除菌 (较难过滤),4℃保存,终浓度为1mol/L。 (2)5g
1、原理 与血清蛋白电泳相同,利用各种蛋白质在电场作用下迁移率不同来进行检测。由于CSF蛋白质含量较低,电泳前须进行浓缩处理。一般采用透析法浓缩,将CSF加入透析袋内,置于吸水的透析液中,CSF中的水分移至透析液内,CSF的蛋白质浓度增加后,再进行电泳分析。 2、试剂与器材 (1)器材透析膜可商品化购买,亦可用玻璃纸袋;电泳设备同血清蛋白电泳。 (2)试剂透析液为聚乙二醇20000氯化钠溶液:称取聚乙二醇2000030.0g,氯化钠0.9g,加90ml蒸馏
化钠0.9g,加90ml蒸馏水溶解,再加巴比妥缓冲液(pH8.6,0.05mol/L)10ml,混匀,溶液pH为7.4.透析液亦可用500g/L的右旋糖酐溶液。 3.方法先将CSF加入透析袋内,放入聚乙二醇20000氯化钠溶液中,室温透析6~7小时(如用500g/L的右旋糖酐溶液,透析2~4℃时需15小时),浓缩至0.05~0.1ml即可。浓缩的脑脊液按血清蛋白电泳的方法进行电泳分析医`学教育网搜集整理。 正常脑脊液蛋白电泳带与血清蛋白电泳带有不同之处:脑脊液出现较多的前白蛋白而血清中较少
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