TQplex 多重qPCR 2X Taqman 探针预混液

如何选择qPCR预混液

液为预先优化好的混合物，通常包含缓冲液、DNA聚合酶、dNTP、MgCl2及其他专利的添加剂。 一些专业人士坦言，对于多个指标，包括qPCR 效率、特异性、灵敏度、速度及耐受多个循环条件和样品类型，目前还尚未实现完美的平衡。大部分qPCR预混液能够在一些方面胜出，但很难是全部。如何选择最适合的那一个，小编下面给出了一些建议。 探针 还是染料? 当然，就多重分析而言，探针法是唯一选择。SYBR Green只适合单重反应。不过，SYBR Green的优势

qPCR常见问题及其分析

一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400mM；模板如果是总RNA一般是10ng-500，如果cDNA，通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液，要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值，在操作过程中，还需要根据所用

Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手

。现在已经涉及到生命科学研究的各个领域，比如基因的差异表达分析，SNP 检测，等位基因的检测，药物开发，临床诊断，转基因研究等。 在 Real-time qPCR 技术的发展过程中，定量 PCR 仪的发展起了至关重要的作用。1995 年，美国 PE 公司（已经并入 Invitrogen 公司）成功研制了 Taqman 技术，1996 年推出了首台荧光定量 PCR 检测系统，通过检测每个循环的荧光强度，通过 Ct 值进行数据分析。从而荧光定量 PCR 获得广泛应用。现在的定量 PCR 仪有 ABI