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文献和实验Novak等构建了一种报告小鼠品系(reportermiceline),在这种转基因小鼠中他们用肌幼蛋白启动子调节一段基因序列的表达,这段基因序列由lacZ和加强型绿色荧光蛋白(EGFP)的编码区串联构成,其中在lacZ的编码区3’端含有翻译终止密码子,并且lacZ整个编码区的两侧各有一个loxP位点。 报告小鼠转基因的设计方案 通过这样一个转基因小鼠可以观察不同启动子调控的Cre基因的表达定位,进一步可以观察Cre-loxP系统引起的目标
获得开放。 这样一个含有靶基因、分割序列和loxP位点的基因片段通常被置于一些持续表达基因(如p―肌动蛋白、还原磷酸甘油醛脱氢酶)的启动子的调控之下,从而使这样一个功能单位在生物体内的各个时期、各种组织和器官中都能够持续获得转录。但是由于分割序列的存在,靶基因并不能在这些组织中翻译出有功能的蛋白质。 分割序列一般选择绿色荧光蛋白(EGFP)或lacZ的编码序列,这两种基因的产物都可以作为一种标记物,在loxP转基因动物体内标记靶基因的存在。 条件
相关专题 在研发转基因小鼠或基因嵌入报告基因模式小鼠的过程中,经常要用到报告基因。常用的报告基因包括:lacZ、EGFP、zsGreen、EYFP、DsRed (DsRed2)、mRFP、mCherry、HuCD2、Thy1.1、HA tag、FLAG tag、Luciferase等。那什么时候选择哪种reporter呢? 做小鼠胚胎发育的研究人员一般喜欢用LacZ,也就是将LacZ置于一个启动子的调节之下。用LacZ可以进行胚胎全身染色
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