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Rosetta-gami B(DE3)pLysS

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  • XYbscience
  • 美国/中国
  • XY1041
  • 2025年07月10日
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    • 英文名

      Rosetta-gami B(DE3)pLysS

    • 库存

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    • 供应商

      信裕生物

    • 规格

      10×100μl/50×100μl

    Rosetta-gami B(DE3)pLysS感受态细胞

    感受态细胞基本信息

    感受态细胞名称: Rosetta-gami B(DE3)pLysS, Rosetta-gamiB(DE3)pLysS, Rosetta gami B DE3 pLysS, Rosetta-gami B DE3 pLysS
    菌株类型: E.coli
    产品目录号: 71137-3, 71137-4
    培养基: LB培养基
    生长条件: 37 ℃, 有氧
    基因型: Rosetta-gami B(DE3)pLysS感受态细胞菌株基因型
    抗性: 氯霉素,卡那霉素,四环素
    质粒转化条件: 42 ℃热激
    应用: 蛋白表达
    诱导方法: IPTG
    菌株特点:
    Rosetta-gami B系列菌株来源于Origami B系列菌株,是集合了BL21系列,Rosetta系列菌株和Origami系列菌株的优点,极大的增强了细胞内二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密码子的真核细胞蛋白的表达能力。

    Rosetta-gami B系列菌株是来源于Origami B系列菌株,携带有TrxB和Gor基因突变,提高含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达。

    本菌株含有pRARE质粒,能够提供原Rosetta(DE3)宿主菌含有 的AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个稀有密码子的tRNA外,增加了真核细胞的在大肠杆菌中的蛋白表达水平。

    Rosetta-gami B(DE3)pLysS菌株在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。

    TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那和四环素抗性,所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质粒的蛋白表达。

    Rosetta-gami B(DE3)pLysS感受态细胞来源于含有BL21系列菌株中的lacZY基因突变,能够通过IPTG高效控制目的基因的表达。

    DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。

    含有pLSs质粒,pLySs质粒能够产生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。

    Rosetta-gami B(DE3)pLysS感受态细胞能够用于氨苄抗性和壮观霉素抗性质粒的原核表达。

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    图标文献和实验
    相关实验
    • 原核表达--宿主菌株选择指南

      2系列,thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)两条主要还原途径双突变菌株,显著提高细胞质中二硫键形成几率,促进蛋白可溶性及活性表达。(卡那霉素敏感)Rosetta-gami™ 2 则是综合上述两类菌株的优点,既补充7种稀有密码子,又能够促进二硫键的形成,帮助表达需要借助二硫键形成正确折叠构象的真核蛋白。(卡那霉素敏感)Origami B 是衍生自 lacZY突变的 BL21菌株,这个突变能根据IPTG的浓度精确调节表达

    • 原核表达之宿主菌株选择指南

      Rosetta-gami B 细胞死亡,生长极困难 毒性蛋白 更严格的本底表达控制 pLysS 菌株 无克隆生长 过高本底表达 更严格的本底表达控制 pLysS、pLysE 菌株 重组质粒和菌株的保存建议 在实验室里保存重组菌株的时候,为了挑菌和传代方便,我们常用LB平板保存在4℃冰箱中,需要提质粒和表达接种的时候,就直接从平板上挑菌,但是这种方法对于重组质粒的稳定性不利

    • 原核表达--宿主体系选择指南

      Rosetta 2 Rosetta-gami 2 Rosetta-gami B RosettaBlue 出现截短蛋白 包涵体 二硫键形成困难 降低宿主胞质的还原性;利用促进二硫键形成的各种载体标签

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