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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 英文名:
pX330A-1x2
- 库存:
100
- 供应商:
kelei-bio
- 规格:
20μl
使用说明书: 柯雷质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,取1μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。
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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具,今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作,仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒,如下图所示: 酶切系统 37 ℃, 3 hr;Run 1% gel,回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端,以利于下游 oligo 退火产物的连接;酶切时请充分,且绝对不能加 CIP 处理
Fluorescence Mounting Medium (Antifade)
Materials Needed 20ml glass scintillation vial Small stir bar Foil Glycerol 1X PBS Pipets * P-phenylenediamine ( EMD Chemicals Inc. Cat# PX0730) Carbonate-Bicarbonate Buffer
基因。实验报告基因用于测试实验条件下基因的表达,而对照报告基因作为内对照,以使实验报告基因测试的结果归一化。作归一化可消除实验过程中减弱实验准确度的变化,如培养细胞的数量、细胞转染 及裂解的效率等。在研究转录调控启动子活性中,具体实验步骤如下。 1. 质粒转染细胞 1) 细胞 铺板:将细胞按70%的汇合度接种到96孔板。 2) 转染:16h后转染萤光素酶报告基因 质粒和RNA,每个样品设置6个复孔 a) 配制DNA和转染试剂 : 96孔板转染质粒时
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