pCRISPR-mCherry-Neo/pCRISPR- C

DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列有专一性要求么

。 由此题我发现，目的基因由两种限制酶切割，一端由EcoRI切出黏性末端，另一端由AluI切出平末端;载体质粒由两种限制酶切开，一端由EcoRI切出黏性末端，另一端由SmaI切出平末端。在构成重组 质粒时，两个黏性末端碱基互补，由DNA连接酶可以连接上磷酸二酯键，这没有疑议。但是另一端两个平末端也能由DNA连接酶连接上，并且原题中第(3)问“图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求? 。”答案为“否”。 也就是由此题我们可以得出一个结论：DNA连接

调皮的基因——人类的「生死簿」

，老鼠的儿子会打洞，就是基因的功效了。 然而，并不是所有的基因都朝着利于生物期待的方向发展。有研究表明有些基因也在默默的做着「见不得人」的事情。比如说嗜睡 [1]、记忆力下降 [2]、再比如喝酒后失态、鲁莽行为 [3]、再再比如天生对疼痛不敏感 [4]。然而这些并不是最可怕的，更可怕的是最近由华南农业大学研究者 [5] 发现的一种耐药基因——MCR-1。 MCR-1 可使细菌对多粘菌素（我们剩下的最后一道抗菌防御）产生高度耐药性。MCR-1 基因存在于细菌的质粒

献给初学者：大神教你瞬时转染快，准，狠

靶基因的表达情况，或者细胞表型（phenotype）的变化，例如凋亡，周期，增殖，侵袭，转移等。那该怎么做呢01 实验前准备lipofectamine2000（转染试剂）（避光），Opti-MEMI 减血清培养基（避光），目的基因的质粒或者 siRNA（以 siRNA 为例），细胞，六孔板，培养基，以及一些细胞实验所需的普通物品。02 步骤1）细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到 60%~80% 覆盖。2）细胞