pMac-H质粒

大神教你瞬时转染快，准，狠！

siRNA 设计的靶点不好，一般情况下公司都是三保一，所以有一些确实存在敲不下来，或者过表达的质粒太长，例如基因长度大于 4000bp 的一般过表达效率不高。 2）这些质粒或者 siRNA 过期了。 3）转染的时间太短，或者 siRNA 或者质粒给的浓度太低，可以延长转染的时间，例如 4~6h 换液，改成 8h 换液。或者加大质粒或者 siRNA 浓度，例如之前给以 5ul，现在可以加 7.5 或者 10ul。   师兄，转进去细胞全死了？ 答：是不是细胞状态不好，还有可能

手把手教你做好体外 DNA 重组

至总体积 10 ul混合后置 14～16 ℃ 水浴 6～12 h。【注意事项】1）通常 DNA 插入片段与载体 DNA 的摩尔比为 3:1 或 2:1，需根据 DNA 分子量计算，而不取决于浓度；2）平齐末端连接时，插入片段的量要远远大于载体 DNA 的量，可以为 5:1 或更多，即使这样，连接效率仍然很低。3）有时 DNA 一端是粘端，另一端是平端，这种连接与双酶切粘端连接相似；4）不匹配末端需要连接时，首先要将末端处理成平端，然后再进行连接反应。六、重组质粒的转化【实验目的】学习和掌握感受

献给初学者：大神教你瞬时转染如何快，准，狠

：1）转染 siRNA 设计的靶点不好，一般情况下公司都是三保一，所以有一些确实存在敲不下来，或者过表达的质粒太长，例如基因长度大于 4000bp 的一般过表达效率不高。2）这些质粒或者 siRNA 过期了3）转染的时间太短，或者 siRNA 或者质粒给的浓度太低，可以延长转染的时间，例如 4-6h 换液，改成 8h 换液。或者加大质粒或者 siRNA 浓度，例如之前给以 5ul，现在可以加 7.5 或者 10ul。3. 师兄，转进去细胞全死了?答：是不是细胞状态不好，还有可能