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多克隆
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文献和实验模式;同样地,大多数现有的CD20单抗可分为2大类(利妥昔单抗样和ofatumumab样),而来自DNA免疫动物的CD20单抗表现出9种已知的和未知的特点。DNA免疫过程中温和的抗原递呈方式可解释表位模型的多样化,而新发现的表位可能在传统的蛋白免疫过程中被破坏掉。 来自DNA免疫动物的单克隆抗体可与现有的单抗药物想媲美。在流式细胞试验中,SDIX公司研制的单克隆抗体表现出高亲和性和反应独特性,其研制的所有ADORA2A单抗在流式细胞试验中反应强烈,而CXCR4和CD20的多种单克
,2000rpm离心10分钟,收集细胞,PBS洗2次,加70%的乙醇混匀,4℃,固定一小时,2000rpm离心10分钟,弃上清,PBS洗2次,加20l PI室温避光放置15分钟,FACS测定。二、实验结果1、抗CD20 ScFv 噬菌体显示文库建立、筛选及鉴定CD20 ScFv噬菌体抗体库的大小约为3x106,即1微克DNA转化后获得106 个克隆。第一次panning前的文库大小为106,经5轮panning后,获得一均一文库,文库的大小约为107。利用ELISA方法,以Daudi细胞为抗原,随机
[6]。以CD20作为治疗B淋巴细胞瘤的理想靶点具有很好的选择性。HI47(IgG3)是我所于1990年研制成功的国内第一个抗CD20鼠源性单克隆抗体,第四届国际人类白细胞分化抗原会议将HI47命名为CD20+X[7]。我们利用噬菌体显示技术克隆到HI47可变区基因,利用该基因构建了嵌合抗CD20 Fab片段,并在大肠杆菌中可溶性分泌表达[8],本研究旨在研究抗CD20 Fab抗肿瘤活性的机制。一、材料与方法1、材料PI为Sigma公司产品;3H-UdR购于中国原子能研究所;Raji细胞为我室所存,用含小牛
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