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文献和实验做好准备工作之后,先把旧的培养基倒掉。再用PBS洗两遍,然后加0.05%胰酶/EDTA,剂量根据培养瓶大小定,一般是25cm 2 的瓶子大约0.8-1ml,轻摇10——15秒,使消化液均匀覆盖瓶底即可,再倒掉。置培养箱3-5分钟(看消化效果而定),等大部分细胞呈流沙状滑落时,即加入培养基终止消化,一般以1:5左右的比例传代(视计数结果和看细胞长满的程度而定)。这种方法养比较顽强的细胞很好,既节省步骤,也降低了离心和较长时间消化对细胞带来的损伤,其实大家也可以试试用这种方法养别的细胞。主要做
该词来源于希腊文的 Kλωγ,原义为小枝之集聚,但后来则指由无性繁殖所产生的同基因型的生物群,这是于 1903年由 H. J. Webber最早应用于生物学上的。过去曾译作具有繁殖意思的营养系或含有原语源意思的分支系(群),而现在则多按其原音直接称为克隆。现在该词在个体、细胞和基因等三方面都使用,而且任何一方面似乎都意味着来自同源的犹如复制一样的同一生物群体。( 1)关于个体:由无性繁殖所增殖的种群均是克隆,这在植物方面,通过体细胞培养,在试管内繁殖、分化可以重新生出完整
Characterization of 5‐HT1A,B and 5‐HT2A,C Serotonin Receptor Binding
6 ) 170 mM Tris⋅Cl buffer, pH 7.4 ( appendix 2A ), room temperature and 4°C (adjust pH at desired temperature) 5 mM 5‐HT (e.g., RBI, Sigma, Tocris
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