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Origami B(DE3)pLysS大肠杆菌表达菌

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      300UL

    基因型: F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522:: Tn10 trxB pLysS (CamR, KanR, TetR) 基本信息: 抗性:kan /tet/Chl 培养基:LB 菌株类别:大肠杆菌 培养条件:37℃,有氧,LB 质粒转化:42℃热激 保存方式:20%甘油,-20℃ 基本应用:用于蛋白表达 备注: 菌株简介: Origami B host strains carry the same mutations in trxB and gor as the original Origami strains, except that they are derived from a lacZY mutant of BL21 to enable precise control of expression levels by adjusting the concentration of IPTG. Thus the Origami B strains combine the desirable characteristics of BL21, Tuner™, and Origami strains in one strain background. The mutations in trxB and gor are selectable on kanamycin and tetracycline, respectively; therefore, these strains cannot be used with plasmids that can only selected with kanamycin or tetracycline. These strains also include the lon and ompT deficiences of BL21, which increase protein stability. DE3 indicates that the host is a lysogen of λDE3, and therefore carries a chromosomal copy of the T7 RNA polymerase gene under control of the lacUV5 promoter. Such strains are suitable for production of protein from target genes cloned in pET vectors by induction with IPTG. pLysS strains express T7 lysozyme, which further suppresses basal expression of T7 RNA polymerase prior to induction, thus stabilizing pET recombinants encoding target proteins that affect cell growth and viability.

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    • DNA Origami: Synthesis and Self‐Assembly

      origami assemblies using a four‐way connector. Chem. Commun. 47:3213‐3215.    Endo, M., Hidaka, K., and Sugiyama, H. 2011b. Direct AFM observation of an opening event of a DNA

    • 【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)

      性不利,容易出现质粒丢失、表达水平不稳定、菌株退化乃至发生污染等情况。 我们建议: 1、长期存放菌株和pET重组子应该存在甘油-70℃保种。但是要注意高浓度甘油(>10%)会导致质粒不稳定。请尽量保持甘油浓度8%。(15%浓度的甘油保种液和新鲜菌液1:1就行)2、重组质粒不宜长期保存于表达菌株(带DE3大肠杆菌)中,请尽量使用带有recA endA突变的克隆菌株(比如C600,DH5a)进行质粒抽提和保存质粒。表达型的菌株提质粒经常会有质量不高或者背景的问题。特别是大量抽提。

    • 如何阅读质粒图谱

      相关,不同的载体是不一样的。一个载体可只看它的启动子到终止子那一段,其它的可以考虑少些。 pET 表达菌株的相关信息 ( DE3 )指宿主为 λ DE3 溶原菌,其染色体上带有一拷贝由 lacUV5 启动子控制的 T7 RNA 聚合酶基因。这类菌株适用于从克隆到 pET 载体的目标基因生产蛋白。命名为 pLysS 和 pLysE 的宿主菌带有编码 T7 溶菌酶(为 T7 RNA 聚合酶的天然抑制物)的 pET 相容性质粒。带有 pLysS 的细胞

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