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- GIBCO
- KL-XQ-0008
- 美国
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 供应商：
柯雷生物
- 英文名：
详情请电联
- 规格：
500ml
Sera Category: Secure
Origin: New Zealand
Collected from calves 14 days old or less.
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文献和实验一、SP 法 1）脱蜡、水化；2）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；3）3% H2O2（80% 甲醇）滴加在 TMA 上，室温静置 10 分钟；4）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；5）抗原修复；6）PBS 洗 2～3 次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗 50μl，室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9）4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10）PBS 洗 3 次各 5 分钟；11）滴加 Ⅱ 抗 40～50 μl，室温
, 轻轻漂洗干净。 第三步：免疫荧光染色 视网膜置于3 g· L-1TritonX-100中4 ℃孵育1 h；从TritonX-100中取出后滴加山羊血清室温封闭抗原2 h, 吸去封闭液, 不洗。水浴箱孵育a-SMA单克隆抗体(1:100, 1 g· L-1TritonX-100稀释)37 ℃，3 h。滴少许抗荧光淬灭剂封片, 于荧光显微镜490 nm波长下观察。 操作要点 推挤出视网膜后，建议用眼科手术刀将视网膜切开而不推荐剪刀剪，因为眼科剪较厚，容易将视网膜挤压变形，当然熟练
缓冲盐水 (10X TBS)：在 800 ml 蒸馏水中加入 24.2 g 三羟甲基氨基甲烷（Trizma base, C4 H11NO3）和 80 g 氯化钠（NaCl）。用浓盐酸将 pH 调节到 7.6，定容至 1 L。6. 抗体稀释液a. SignalStain? 抗体稀释液 #8112b. TBST / 5% 正常山羊血清： 5 ml 1 X TBST 中添加 250 ?l 正常山羊血清。c. PBST / 5% 正常山羊血清： 5 ml 1 X PBST 中添加 250 ?l 正常山羊血清
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