| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pDest40 |
| 质粒类型: | Gateway系统载体；哺乳动物细胞表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 启动子: | CMV |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 7143bp |
| 5' 测序引物及序列: | T7 Fwd: 5'd[TAATACGACTCACTATAGGG]3' |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | V5 epitope （C-端）；6X His tag （C-端） |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素,氯霉素（仅空载体） |
| 筛选标记: | Neomycin |
| 克隆菌株: | ccdB阳性筛选 DB3.1 感受态细胞， 阴性筛选用OmniMAX2-T1 感受态细胞 |
| 宿主细胞（系）: | 常规细胞系，293、CV-1、CHO等 |
| 备注: | -- |
| 产品目录号: | -- |
| 稳定性: | 瞬表达 或 稳表达 |
| 组成型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥2000
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pDest40
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
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文献和实验相关实验
蛋白相互作用的一种有效工具。在ProQuest™系统中加入GateWay™技术，使您仅通过一个克隆步骤就可以在多个表达系统中表达可能的相互作用子蛋白，从而简化了下游的基因分析 ProQuest™工作原理 ProQuest™系统依靠报告基因的转录激活来鉴定蛋白相互作用。将一个基因克隆到"诱饵"载体，pDEST™ 32，并和GAL4蛋白的DNA结合域（DBD）表达为融合蛋白。将第二个基因或者编码可能的相互作用子蛋白的cDNA文库克隆到"猎物"载体，pDEST™ 22，同GAL4的转录
研究应用｜使用 NanoBiT 技术进行的蛋白质相互作用细胞内定位成像
NanoBiT 的细胞内定位成像 为进行细胞溶质和核酸表达，我们将两种载体对转染到 HeLa 细胞中。第一对为非靶向 FKBP-SmBiT 控制载体和 FRB-LgBiT 控制载体。第二对为细胞核靶向 NLS-FKBP-SmBiT 控制载体和 FRB-LgBiT 控制载体（图 2）。已知 FKBP 和 FRB 会在西罗莫司治疗下结合。 图 2. FKBP/FRB NanoBiT 和 NLS-FKBP/RRB NanoBiT 的细胞内定位 然后使用 IXplore Live
Step 2 · 根据线性化载体两端的序列，设计目标片段的引物——划重点！这对引物外侧要有 15-40 碱基与载体两端分别同源，内侧要有 15-20 个碱基与目标片段同源。如果想要设计启动子 SD 序列跟 ATG 的距离，这就是好机会。合成引物不要超过 65 个碱基为好。 · Step 3 · 以这对引物PCR目标基因，就能得到两端与载体同源的目标片段。按比例混合片段和线性化载体，加入关键试剂——预混酶并在 50 度保温 15-60 分钟（因插入片段数量而略有不同，以操作手册为准）——以赛默
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