- ¥1000
- XYbscience
- 中国/美国
- XY1433
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pRNATin-H1.2/Neo
- 库存：
60
- 供应商：
信裕生物
- 规格：
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | RNAi载体 |
|---|---|
| 启动子: | H1.2 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 6127 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | TAATACGACTCACTATAGGG |
| 3' 测序引物及序列: | TAGAAGGCACAGTCGAGG |
| 载体标签: | cGFP |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | Neomycin (新霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1433 | pRNATin-H1.2/Neo | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
pRNATin-H1.2/Neo/siFluc is a GenScript siRNA expression vector. It is designed for mammalian transfection. The GFP marker (coral GFP, cGFP) under CMV promoter control can be used to track the transfection efficiency. It uses the H1.2 promoter, an engineered inducible promoter containing a tetracycline operator (TetO1) for siRNA expression. This vector contains siRNA construct for Firefly luciferase, and can be used as a positive control. It can also be used as a siRNA vector using BamH I and Hind III for siRNA insertion.
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文献和实验一、试剂准备 1、Cas9 过表达慢病毒载体选择。 货号 名称 CR2001 pLV-Cas9-Puro CR2002 pLV-Cas9-Neo CR2003 pLV-Cas9Nick-Puro CR2004
，37℃、5%CO2培养，待细胞占50～70%瓶底面积时，用于转染试验。(3)DNA-磷酸钙沉淀物的制备: ①将供体细胞DNA和PSV2-neo质粒载体DNA用TE配制成40mg/L的DNA溶液，同时向供体细胞DNA液200μl中加入带基因neo质粒DNA液(20mg/L)220μl和2×HBS 250μl(PSV2-neo为1～2mg/L的使用量)。 ②取500μl上述DNA溶液加入硅化试管中，缓慢加入3.1ml、2mol/L CaCl2混匀30秒。 ③然后立即混旋，室温下静置30分钟
双链短RNA（dsRNA)阻断基因表达机理及双链RNA的构建
。而且转录出的RNA形成发卡样结构后，会在3’端形成2个突出的尿嘧啶，这类似于天然的 siRNA,因而有利于双链RNA诱发RNAi。 RNA多聚酶Ⅲ还能识别H1-RNA 启动子。在H1-RNA 启动子后面接上能形成发卡样结构的反向互补序列，将此载体转入细胞后也能在细胞内合成dsRNA[9]。 T7也可作为启动子合成dsRNA。将PCR产物用NotI酶切后自身连结，回收正向片断和反向片断连结形成的具有反转重复序列的片断，接到pGEMTeasy载体上，就构建成了可以表达dsRNA
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