- ¥1500
- XYbscience
- 中国/美国
- XY1772
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pESC-TRP
- 库存：
60
- 供应商：
信裕生物
- 规格：
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 酵母表达载体 |
|---|---|
| 表达水平: | 高拷贝 |
| 诱导方法: | 半乳糖 |
| 启动子: | GAL1和GAL10 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 6525 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | GAL1-F: ATTTTCGGTTTGTATTACTTC; GAL10-F: GGTGGTAATGCCATGTAATATG |
| 3' 测序引物及序列: | GALI-R: GTTCTTAATACTAACATAACT GAL10-R: GGCAAGGTAGACAAGCCGACAAC |
| 载体标签: | C-Flag, C-Myc |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | TRP1 |
| 备注: | 利用半乳糖诱导，可以同时使两个基因在酿酒酵母中表达。 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1772 | pESC-TRP | 5ug质粒 |
¥1500.00 |
质粒图谱
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文献和实验Trp平板上，转化效率应该在1 x105 colonies/mg DNA以上。 4.杂交效率不高，该如何处理? 在杂交中，预转化的诱饵细胞的数量可能不够。当对诱饵菌株进行液体培养过夜时，应挑选大的、新鲜的克隆进行培养，经过离心和重悬后，再使用血球计对细胞进行计数。密度应该在1 x109/ml。 一个甚至两个融合蛋白对酵母细胞有毒。你可以通过重组方法来减轻毒性，同时又能保证蛋白的相互作用。或者使用表达水平较低的载体。也可以在琼脂平板或滤膜上进行杂交。但同时必须作杂交对照实验。
喜欢转贴的，请注明来自中国生命科学第一网：丁香园。 根据自己体会和蛋白版的既往精华帖子，总结了没有发现蛋白质表达的原因，或者蛋白质不表达的原因，欢迎大家拍砖。 1.载体构建错误。 这个屡见不鲜，很多克隆新人经常弄错读码框。比如Qiagen的pQE系列载体，其克隆位点常有一两个碱基的区别；另外有些酶产生粘端有些酶产生平端，这些都容易导致读码框错误，从而表达不出来。 2.宿主菌选择不当。不同的宿主菌其基因型是不一样的。有些经过特殊修饰的载体，或者特殊用途的载体，或者有特殊启动
，然后重新检测其是否自激活，但要注意重组也有可能破坏蛋白之间的互作。3.转化效率太低怎么办？可以采用以下方法解决：1)检测一下DNA的纯度，如果可以的话，重新用乙醇纯化。2)DNA-BD/诱饵蛋白很可能是有毒的。3)不适当的培养基，重新配制培养基，并做对照转化。4)检测pGBT9对照载体的转化效率，放置于SD/–Trp平板上，转化效率应该在1 x105 colonies/mg DNA以上。4.杂交效率不高，该如何处理？在杂交中，预转化的诱饵细胞的数量可能不够。当对诱饵菌株进行液体培养过夜时，应挑选
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