| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pFastBac-N-GST-TEV |
| 质粒类型: | 昆虫细胞表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | -- |
| 启动子: | -- |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | -- |
| 5' 测序引物及序列: | -- |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | GST |
| 载体抗性: | -- |
| 筛选标记: | -- |
| 备注: | -- |
| 产品目录号: | -- |
| 稳定性: | -- |
| 组成型: | -- |
| 病毒/非病毒: | 杆状病毒 |
- ¥1350
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY
- 2025年07月12日
11 年钻石会员
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pFastBac-N-GST-TEV
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
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文献和实验相关实验
Protease 是一种由人鼻病毒 14 型的 3C 蛋白酶和 GST 组成的融合蛋白。它可以特异性的将 pGEX-6P 系列等载体表达出的带有酶底物识别氨基酸序列融合蛋白的 GST 标签进行分离。由于其自身带有 GST 标签，Prescission Protease 能在单一步骤实现 GST 标签的柱上酶切和蛋白质纯化。此蛋白酶在低温条件下具有最佳活性，因此低温孵育不仅可以保证 GST 标签的高效去除，也能维持目标蛋白的活性。 Thrombin 和 Factor Xa 常温下具有较高的酶活，当选
strep-tag 对 Strep-Tactin XT的亲和力，大规模纯化 CB2 蛋白；然后通过 WB 检测 MBP-CB2 的表达情况，G 蛋白激活实验检测 CB2 的功能活性。 3、CB2 蛋白的纯化的策略：根据不同构建载体表达的情况及 Strep-Tactin 亲和力的测试，作者通过串联亲和层析对 CB2 蛋白进行纯化，分别使用 C 端 His10 和 N 端 twin-Strep-tag。首先使用 Ni-resin 进行第一步纯化后，再从含有 CB2 蛋白的粗提物进行透析，用 TEV 蛋白
蛋白有更好的可溶性。另外，使用NusA系统验证，八个较大分子量蛋白（>70kDa）中的七个得到了可溶性表达，而其它的融合标签（GST，MBP和hexahistidine）系统则只得到了四个可溶性表达的蛋白。 表1. 用大量的目标蛋白评估NusA标签对提高融合蛋白可溶性的作用 参考文献a 目的蛋白数目
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pFastBac-N-GST-TEV载体
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