pEE6.4载体

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    • 英文名

      pEE6.4

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      20

    • 供应商

      泽叶生物

    pEE 6.4载体基本信息

    出品公司: ZYbscience
    载体名称: pEE6.4, pEE 6.4
    质粒类型: GS系统哺乳动物细胞蛋白表达载体,抗体表达载体
    高拷贝/低拷贝: 高拷贝
    启动子: hCMV-MIE
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: --
    5' 测序引物及序列: --
    3' 测序引物及序列: --
    载体标签: --
    载体抗性: 氨苄
    筛选标记: GS (Glutamine Synthetase, 谷氨酰胺合成酶)
    备注: 配套细胞是NSO细胞或者CHOK1SV细胞
    产品目录号: --
    稳定性: 稳定表达
    组成型: --
    病毒/非病毒: 非病毒

    pEE 6.4载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pEE6.4多克隆位点

    pEE 6.4载体简介

    Lonza生物公司的Glutamine Synthetase(GS, 谷氨酰胺合成酶)基因表达系统载体pEE6.4载体,利用谷氨酰胺合成酶筛选标记,能够高水平的在哺乳细胞内表达目的基因。

    GS酶是生物体内以谷氨酸和氨为底物合成谷氨酰胺的酶。GS酶的活性能够被甲硫氨酸砜亚胺(methionine sulphoximine,MSX)选择性的抑制。一些哺乳动物细胞,例如小鼠骨髓瘤细胞(NSO细胞系)无法表达GS,所以在不添加谷氨酰胺的情况下, 细胞将无法生长。对于这些细胞系,在无谷氨酰胺的培养基内,一个转染的GS基因可以作为一个筛选标记。其他的一些细胞系,例如CHO-KI,能够产生内源 性的GS酶。对于这些细胞,在无谷氨酰胺培养基内,在高水平足够抑制GS酶合成的MSX(甲硫氨酸砜亚胺)的作用下,可以对细胞的生长提供一个选择压力。

    1992年,Bebbington等首次报道了使用GS基因细胞系统表达重组的抗体。该载体能够被用来构建快速,高产量,稳定的单克隆抗体表达细胞系。

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