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pTrcHis C载体

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  • ZYbscience
  • 中国/美国
  • ZY360-20
  • 2025年07月14日
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      三年

    • 英文名

      pTrcHis C

    • 库存

      20

    • 供应商

      泽叶生物

    pTrcHisC载体基本信息

    出品公司: ZYbscience
    别名: pTrcHisC, pTrcHis C
    质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达载体
    表达水平: 高拷贝
    启动子: Trc
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 4412 bp
    5' 测序引物及序列: pTrcHis-F: gaggtatatattaatgtatcg
    3' 测序引物及序列: pTrcHis-R:GATTTAATCTGTATCAGG
    载体标签: N-His, N-EK
    载体抗性: Ampicillin
    备注:
    Hosts: E.coli NM522, E.coli INValphaF'. Related vectors: pSE420.
    产品目录号: ZY360-20
    稳定性: 瞬时表达 Transient
    组成型: 组成型 Constitutive
    病毒/非病毒: 非病毒

    pTrcHisC载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pTrcHisC载体图谱

    pTrcHisC载体多克隆位点

    pTrcHisC载体简介

    pTrcHis载体是来由pBR322质粒衍生而来的表达载体,设计用来在大肠杆菌中进行重组蛋白的高效表达和纯化。

    载体上的Trc启动子和rrnB抗终止区使得高水平蛋白表达成为可能.Trc启动子由Trp启动子的-35区域和Lac启动子的-10区域共同组成。pTrcHis载体同时包含有一个LacIq基因,该基因编码了Lac启动子的抑制蛋白。LacIq基因的存在使得宿主菌是LacIq+还是LacIq-都可以高效抑制插入基因的转录。

    进行蛋白表达时,大肠杆菌需要生长到对数生长期,然后加入1mM IPTG,去除阻遏蛋白,诱导表达。载体上的迷你顺反子结构能够增强插入基因的转录水平,从而高水平表达目的蛋白。DNA插入片段位于载体表达片段下游,在其上游有一个N-端融合表达多肽序列,该序列包含有ATG起始密码子,6xHis标签,T7噬菌体10号基因的翻译增强子,X press抗原表位,肠激酶酶切识别位点。

    pTrcHisC载体序列

    LOCUS pTrcHisC 4412 bp DNA circular SYN
    DEFINITION pTRCHISC
    ACCESSION
    KEYWORDS
    SOURCE
    ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
    COMMENT This file is created by Vector NTI
    http://www.biofeng.com/
    COMMENT ORIGDB|GenBank
    COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
    FEATURES Location/Qualifiers
    source 1..4412
    /organism="pTRCHISC"
    /mol_type="other DNA"
    misc_feature 235..257
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    misc_feature 264..333
    /label="rrnB_ATS"
    misc_feature 370..390
    /label="pTrcHis_fwd_primer"
    misc_feature 383..409
    /label="minicis"
    misc_feature 445..463
    /label="Xpress_fwd_primer"
    misc_feature 446..478
    /label="T7_leader"
    misc_feature 482..505
    /label="Xpress_EK"
    misc_feature complement(595..612)
    /label="pBAD_rev_primer"
    misc_feature complement(595..612)
    /label="pTrcHis_rev_primer"
    terminator 645..802
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    terminator 768..811
    /label="rrnB_T1_terminator"
    terminator 943..970
    /label="rrnB_T2_terminator"
    promoter 1012..1040
    /label="AmpR_promoter"
    gene 1082..1942
    /label="Ampicillin"
    /gene="Ampicillin"
    CDS 1082..1942
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    DRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
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    misc_feature 3113..3135
    /label="pGEX_3_primer"
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    EIGASLIKHW*"
    misc_feature 3282..4373
    /label="lacI"
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    LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIA
    EIGASLIKHW*"
    CDS 3414..4373
    /label="ORF frame 3"
    /translation="MAELNYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKS
    RADQLGASVVVSMVERSGVEACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNV
    PALFLDVSDQTPINSIIFSHEDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGW
    HKYLTRNQIQPIAEREGDWSAMSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITE
    SGLRVGADISVVGYDDTEDSSCYIPPSTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQ
    LLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPRALADSLMQLARQVSRLESGQ*"
    ORIGIN
    1 gtttgacagc ttatcatcga ctgcacggtg caccaatgct tctggcgtca ggcagccatc
    61 ggaagctgtg gtatggctgt gcaggtcgta aatcactgca taattcgtgt cgctcaaggc
    121 gcactcccgt tctggataat gttttttgcg ccgacatcat aacggttctg gcaaatattc
    181 tgaaatgagc tgttgacaat taatcatccg gctcgtataa tgtgtggaat tgtgagcgga
    241 taacaatttc acacaggaaa cagcgccgct gagaaaaagc gaagcggcac tgctctttaa
    301 caatttatca gacaatctgt gtgggcactc gaccggaatt atcgattaac tttattatta
    361 aaaattaaag aggtatatat taatgtatcg attaaataag gaggaataaa ccatgggggg
    421 ttctcatcat catcatcatc atggtatggc tagcatgact ggtggacagc aaatgggtcg
    481 ggatctgtac gacgatgacg ataaggatcg atggatccga cctcgagatc tgcagatggt
    541 accatatggg aattcgaagc ttggctgttt tggcggatga gagaagattt tcagcctgat
    601 acagattaaa tcagaacgca gaagcggtct gataaaacag aatttgcctg gcggcagtag
    661 cgcggtggtc ccacctgacc ccatgccgaa ctcagaagtg aaacgccgta gcgccgatgg
    721 tagtgtgggg tctccccatg cgagagtagg gaactgccag gcatcaaata aaacgaaagg
    781 ctcagtcgaa agactgggcc tttcgtttta tctgttgttt gtcggtgaac gctctcctga
    841 gtaggacaaa tccgccggga gcggatttga acgttgcgaa gcaacggccc ggagggtggc
    901 gggcaggacg cccgccataa actgccaggc atcaaattaa gcagaaggcc atcctgacgg
    961 atggcctttt tgcgtttcta caaactcttt ttgtttattt ttctaaatac attcaaatat
    1021 gtatccgctc atgagacaat aaccctgata aatgcttcaa taatattgaa aaaggaagag
    1081 tatgagtatt caacatttcc gtgtcgccct tattcccttt tttgcggcat tttgccttcc
    1141 tgtttttgct cacccagaaa cgctggtgaa agtaaaagat gctgaagatc agttgggtgc
    1201 acgagtgggt tacatcgaac tggatctcaa cagcggtaag atccttgaga gttttcgccc
    1261 cgaagaacgt tttccaatga tgagcacttt taaagttctg ctatgtggcg cggtattatc
    1321 ccgtgttgac gccgggcaag agcaactcgg tcgccgcata cactattctc agaatgactt
    1381 ggttgagtac tcaccagtca cagaaaagca tcttacggat ggcatgacag taagagaatt
    1441 atgcagtgct gccataacca tgagtgataa cactgcggcc aacttacttc tgacaacgat
    1501 cggaggaccg aaggagctaa ccgctttttt gcacaacatg ggggatcatg taactcgcct
    1561 tgatcgttgg gaaccggagc tgaatgaagc cataccaaac gacgagcgtg acaccacgat
    1621 gcctgtagca atggcaacaa cgttgcgcaa actattaact ggcgaactac ttactctagc
    1681 ttcccggcaa caattaatag actggatgga ggcggataaa gttgcaggac cacttctgcg
    1741 ctcggccctt ccggctggct ggtttattgc tgataaatct ggagccggtg agcgtgggtc
    1801 tcgcggtatc attgcagcac tggggccaga tggtaagccc tcccgtatcg tagttatcta
    1861 cacgacgggg agtcaggcaa ctatggatga acgaaataga cagatcgctg agataggtgc
    1921 ctcactgatt aagcattggt aactgtcaga ccaagtttac tcatatatac tttagattga
    1981 tttaaaactt catttttaat ttaaaaggat ctaggtgaag atcctttttg ataatctcat
    2041 gaccaaaatc ccttaacgtg agttttcgtt ccactgagcg tcagaccccg tagaaaagat
    2101 caaaggatct tcttgagatc ctttttttct gcgcgtaatc tgctgcttgc aaacaaaaaa
    2161 accaccgcta ccagcggtgg tttgtttgcc ggatcaagag ctaccaactc tttttccgaa
    2221 ggtaactggc ttcagcagag cgcagatacc aaatactgtc cttctagtgt agccgtagtt
    2281 aggccaccac ttcaagaact ctgtagcacc gcctacatac ctcgctctgc taatcctgtt
    2341 accagtggct gctgccagtg gcgataagtc gtgtcttacc gggttggact caagacgata
    2401 gttaccggat aaggcgcagc ggtcgggctg aacggggggt tcgtgcacac agcccagctt
    2461 ggagcgaacg acctacaccg aactgagata cctacagcgt gagctatgag aaagcgccac
    2521 gcttcccgaa gggagaaagg cggacaggta tccggtaagc ggcagggtcg gaacaggaga
    2581 gcgcacgagg gagcttccag ggggaaacgc ctggtatctt tatagtcctg tcgggtttcg
    2641 ccacctctga cttgagcgtc gatttttgtg atgctcgtca ggggggcgga gcctatggaa
    2701 aaacgccagc aacgcggcct ttttacggtt cctggccttt tgctggcctt ttgctcacat
    2761 gttctttcct gcgttatccc ctgattctgt ggataaccgt attaccgcct ttgagtgagc
    2821 tgataccgct cgccgcagcc gaacgaccga gcgcagcgag tcagtgagcg aggaagcgga
    2881 agagcgcctg atgcggtatt ttctccttac gcatctgtgc ggtatttcac accgcatatg
    2941 gtgcactctc agtacaatct gctctgatgc cgcatagtta agccagtata cactccgcta
    3001 tcgctacgtg actgggtcat ggctgcgccc cgacacccgc caacacccgc tgacgcgccc
    3061 tgacgggctt gtctgctccc ggcatccgct tacagacaag ctgtgaccgt ctccgggagc
    3121 tgcatgtgtc agaggttttc accgtcatca ccgaaacgcg cgaggcagca gatcaattcg
    3181 cgcgcgaagg cgaagcggca tgcatttacg ttgacaccat cgaatggcgc aaaacctttc
    3241 gcggtatggc atgatagcgc ccggaagaga gtcaattcag ggtggtgaat gtgaaaccag
    3301 taacgttata cgatgtcgca gagtatgccg gtgtctctta tcagaccgtt tcccgcgtgg
    3361 tgaaccaggc cagccacgtt tctgcgaaaa cgcgggaaaa agtggaagcg gcgatggcgg
    3421 agctgaatta cattcccaac cgcgtggcac aacaactggc gggcaaacag tcgttgctga
    3481 ttggcgttgc cacctccagt ctggccctgc acgcgccgtc gcaaattgtc gcggcgatta
    3541 aatctcgcgc cgatcaactg ggtgccagcg tggtggtgtc gatggtagaa cgaagcggcg
    3601 tcgaagcctg taaagcggcg gtgcacaatc ttctcgcgca acgcgtcagt gggctgatca
    3661 ttaactatcc gctggatgac caggatgcca ttgctgtgga agctgcctgc actaatgttc
    3721 cggcgttatt tcttgatgtc tctgaccaga cacccatcaa cagtattatt ttctcccatg
    3781 aagacggtac gcgactgggc gtggagcatc tggtcgcatt gggtcaccag caaatcgcgc
    3841 tgttagcggg cccattaagt tctgtctcgg cgcgtctgcg tctggctggc tggcataaat
    3901 atctcactcg caatcaaatt cagccgatag cggaacggga aggcgactgg agtgccatgt
    3961 ccggttttca acaaaccatg caaatgctga atgagggcat cgttcccact gcgatgctgg
    4021 ttgccaacga tcagatggcg ctgggcgcaa tgcgcgccat taccgagtcc gggctgcgcg
    4081 ttggtgcgga tatctcggta gtgggatacg acgataccga agacagctca tgttatatcc
    4141 cgccgtcaac caccatcaaa caggattttc gcctgctggg gcaaaccagc gtggaccgct
    4201 tgctgcaact ctctcagggc caggcggtga agggcaatca gctgttgccc gtctcactgg
    4261 tgaaaagaaa aaccaccctg gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg
    4321 attcattaat gcagctggca cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac
    4381 gcaattaatg tgagttagcg cgaattgatc tg

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