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pTrcHis A载体

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  • ZYbscience
  • 中国/美国
  • ZY360-20
  • 2025年07月13日
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      三年

    • 英文名

      pTrcHis A

    • 库存

      20

    • 供应商

      泽叶生物

    pTrcHisA载体基本信息

    出品公司: ZYbscience
    别名: pTrcHisA, pTrcHis A
    质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达载体
    表达水平: 高拷贝
    启动子: Trc
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 4414 bp
    5' 测序引物及序列: pTrcHis-F: gaggtatatattaatgtatcg
    3' 测序引物及序列: pTrcHis-R:GATTTAATCTGTATCAGG
    载体标签: N-His, N-EK
    载体抗性: Ampicillin
    备注:
    Hosts: E.coli NM522, E.coli INValphaF'. Related vectors: pSE420.
    产品目录号: ZY360-20
    稳定性: 瞬时表达 Transient
    组成型: 组成型 Constitutive
    病毒/非病毒: 非病毒

    pTrcHisA载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pTrcHisA 载体图谱

    pTrcHisA多克隆位点

    pTrcHisA载体简介

    pTrcHis载体是来由pBR322质粒衍生而来的表达载体,设计用来在大肠杆菌中进行重组蛋白的高效表达和纯化。

    载体上的Trc启动子和rrnB抗终止区使得高水平蛋白表达成为可能.Trc启动子由Trp启动子的-35区域和Lac启动子的-10区域共同组成。pTrcHis载体同时包含有一个LacIq基因,该基因编码了Lac启动子的抑制蛋白。LacIq基因的存在使得宿主菌是LacIq+还是LacIq-都可以高效抑制插入基因的转录。

    进行蛋白表达时,大肠杆菌需要生长到对数生长期,然后加入1mM IPTG,去除阻遏蛋白,诱导表达。载体上的迷你顺反子结构能够增强插入基因的转录水平,从而高水平表达目的蛋白。DNA插入片段位于载体表达片段下游,在其上游有一个N-端融合表达多肽序列,该序列包含有ATG起始密码子,6xHis标签,T7噬菌体10号基因的翻译增强子,X press抗原表位,肠激酶酶切识别位点。

    pTrcHisA载体序列

    LOCUS pTRCHISA 4414 bp DNA circular SYN
    DEFINITION pTRCHISA
    ACCESSION
    KEYWORDS
    SOURCE
    ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
    COMMENT This file is created by Vector NTI
    http://www.biofeng.com/
    COMMENT ORIGDB|GenBank
    COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
    FEATURES Location/Qualifiers
    source 1..4414
    /organism="pTRCHISA"
    /mol_type="other DNA"
    misc_feature 235..257
    /label="M13_pUC_rev_primer"
    misc_feature 264..333
    /label="rrnB_ATS"
    misc_feature 370..390
    /label="pTrcHis_fwd_primer"
    misc_feature 383..409
    /label="minicis"
    misc_feature 445..463
    /label="Xpress_fwd_primer"
    misc_feature 446..478
    /label="T7_leader"
    misc_feature 482..505
    /label="Xpress_EK"
    misc_feature complement(597..614)
    /label="pTrcHis_rev_primer"
    misc_feature complement(597..614)
    /label="pBAD_rev_primer"
    terminator 647..804
    /label="rrnB_terminator"
    terminator 770..813
    /label="rrnB_T1_terminator"
    terminator 945..972
    /label="rrnB_T2_terminator"
    promoter 1014..1042
    /label="AmpR_promoter"
    gene 1084..1944
    /label="Ampicillin"
    /gene="Ampicillin"
    CDS 1084..1944
    /label="ORF frame 1"
    /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGY
    IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVE
    YSPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRL
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    LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIA
    EIGASLIKHW*"
    rep_origin 2099..2718
    /label="pBR322_origin"
    /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGY
    IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVE
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    DRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
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    misc_feature 3115..3137
    /label="pGEX_3_primer"
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    EIGASLIKHW*"
    misc_feature 3284..4375
    /label="lacI"
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    IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVE
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    DRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
    LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIA
    EIGASLIKHW*"
    CDS 3416..4375
    /label="ORF frame 2"
    /translation="MAELNYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKS
    RADQLGASVVVSMVERSGVEACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNV
    PALFLDVSDQTPINSIIFSHEDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGW
    HKYLTRNQIQPIAEREGDWSAMSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITE
    SGLRVGADISVVGYDDTEDSSCYIPPSTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQ
    LLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPRALADSLMQLARQVSRLESGQ*"
    ORIGIN
    1 gtttgacagc ttatcatcga ctgcacggtg caccaatgct tctggcgtca ggcagccatc
    61 ggaagctgtg gtatggctgt gcaggtcgta aatcactgca taattcgtgt cgctcaaggc
    121 gcactcccgt tctggataat gttttttgcg ccgacatcat aacggttctg gcaaatattc
    181 tgaaatgagc tgttgacaat taatcatccg gctcgtataa tgtgtggaat tgtgagcgga
    241 taacaatttc acacaggaaa cagcgccgct gagaaaaagc gaagcggcac tgctctttaa
    301 caatttatca gacaatctgt gtgggcactc gaccggaatt atcgattaac tttattatta
    361 aaaattaaag aggtatatat taatgtatcg attaaataag gaggaataaa ccatgggggg
    421 ttctcatcat catcatcatc atggtatggc tagcatgact ggtggacagc aaatgggtcg
    481 ggatctgtac gacgatgacg ataaggatcg atggggatcc gagctcgaga tctgcagctg
    541 gtaccatatg ggaattcgaa gcttggctgt tttggcggat gagagaagat tttcagcctg
    601 atacagatta aatcagaacg cagaagcggt ctgataaaac agaatttgcc tggcggcagt
    661 agcgcggtgg tcccacctga ccccatgccg aactcagaag tgaaacgccg tagcgccgat
    721 ggtagtgtgg ggtctcccca tgcgagagta gggaactgcc aggcatcaaa taaaacgaaa
    781 ggctcagtcg aaagactggg cctttcgttt tatctgttgt ttgtcggtga acgctctcct
    841 gagtaggaca aatccgccgg gagcggattt gaacgttgcg aagcaacggc ccggagggtg
    901 gcgggcagga cgcccgccat aaactgccag gcatcaaatt aagcagaagg ccatcctgac
    961 ggatggcctt tttgcgtttc tacaaactct ttttgtttat ttttctaaat acattcaaat
    1021 atgtatccgc tcatgagaca ataaccctga taaatgcttc aataatattg aaaaaggaag
    1081 agtatgagta ttcaacattt ccgtgtcgcc cttattccct tttttgcggc attttgcctt
    1141 cctgtttttg ctcacccaga aacgctggtg aaagtaaaag atgctgaaga tcagttgggt
    1201 gcacgagtgg gttacatcga actggatctc aacagcggta agatccttga gagttttcgc
    1261 cccgaagaac gttttccaat gatgagcact tttaaagttc tgctatgtgg cgcggtatta
    1321 tcccgtgttg acgccgggca agagcaactc ggtcgccgca tacactattc tcagaatgac
    1381 ttggttgagt actcaccagt cacagaaaag catcttacgg atggcatgac agtaagagaa
    1441 ttatgcagtg ctgccataac catgagtgat aacactgcgg ccaacttact tctgacaacg
    1501 atcggaggac cgaaggagct aaccgctttt ttgcacaaca tgggggatca tgtaactcgc
    1561 cttgatcgtt gggaaccgga gctgaatgaa gccataccaa acgacgagcg tgacaccacg
    1621 atgcctgtag caatggcaac aacgttgcgc aaactattaa ctggcgaact acttactcta
    1681 gcttcccggc aacaattaat agactggatg gaggcggata aagttgcagg accacttctg
    1741 cgctcggccc ttccggctgg ctggtttatt gctgataaat ctggagccgg tgagcgtggg
    1801 tctcgcggta tcattgcagc actggggcca gatggtaagc cctcccgtat cgtagttatc
    1861 tacacgacgg ggagtcaggc aactatggat gaacgaaata gacagatcgc tgagataggt
    1921 gcctcactga ttaagcattg gtaactgtca gaccaagttt actcatatat actttagatt
    1981 gatttaaaac ttcattttta atttaaaagg atctaggtga agatcctttt tgataatctc
    2041 atgaccaaaa tcccttaacg tgagttttcg ttccactgag cgtcagaccc cgtagaaaag
    2101 atcaaaggat cttcttgaga tccttttttt ctgcgcgtaa tctgctgctt gcaaacaaaa
    2161 aaaccaccgc taccagcggt ggtttgtttg ccggatcaag agctaccaac tctttttccg
    2221 aaggtaactg gcttcagcag agcgcagata ccaaatactg tccttctagt gtagccgtag
    2281 ttaggccacc acttcaagaa ctctgtagca ccgcctacat acctcgctct gctaatcctg
    2341 ttaccagtgg ctgctgccag tggcgataag tcgtgtctta ccgggttgga ctcaagacga
    2401 tagttaccgg ataaggcgca gcggtcgggc tgaacggggg gttcgtgcac acagcccagc
    2461 ttggagcgaa cgacctacac cgaactgaga tacctacagc gtgagctatg agaaagcgcc
    2521 acgcttcccg aagggagaaa ggcggacagg tatccggtaa gcggcagggt cggaacagga
    2581 gagcgcacga gggagcttcc agggggaaac gcctggtatc tttatagtcc tgtcgggttt
    2641 cgccacctct gacttgagcg tcgatttttg tgatgctcgt caggggggcg gagcctatgg
    2701 aaaaacgcca gcaacgcggc ctttttacgg ttcctggcct tttgctggcc ttttgctcac
    2761 atgttctttc ctgcgttatc ccctgattct gtggataacc gtattaccgc ctttgagtga
    2821 gctgataccg ctcgccgcag ccgaacgacc gagcgcagcg agtcagtgag cgaggaagcg
    2881 gaagagcgcc tgatgcggta ttttctcctt acgcatctgt gcggtatttc acaccgcata
    2941 tggtgcactc tcagtacaat ctgctctgat gccgcatagt taagccagta tacactccgc
    3001 tatcgctacg tgactgggtc atggctgcgc cccgacaccc gccaacaccc gctgacgcgc
    3061 cctgacgggc ttgtctgctc ccggcatccg cttacagaca agctgtgacc gtctccggga
    3121 gctgcatgtg tcagaggttt tcaccgtcat caccgaaacg cgcgaggcag cagatcaatt
    3181 cgcgcgcgaa ggcgaagcgg catgcattta cgttgacacc atcgaatggc gcaaaacctt
    3241 tcgcggtatg gcatgatagc gcccggaaga gagtcaattc agggtggtga atgtgaaacc
    3301 agtaacgtta tacgatgtcg cagagtatgc cggtgtctct tatcagaccg tttcccgcgt
    3361 ggtgaaccag gccagccacg tttctgcgaa aacgcgggaa aaagtggaag cggcgatggc
    3421 ggagctgaat tacattccca accgcgtggc acaacaactg gcgggcaaac agtcgttgct
    3481 gattggcgtt gccacctcca gtctggccct gcacgcgccg tcgcaaattg tcgcggcgat
    3541 taaatctcgc gccgatcaac tgggtgccag cgtggtggtg tcgatggtag aacgaagcgg
    3601 cgtcgaagcc tgtaaagcgg cggtgcacaa tcttctcgcg caacgcgtca gtgggctgat
    3661 cattaactat ccgctggatg accaggatgc cattgctgtg gaagctgcct gcactaatgt
    3721 tccggcgtta tttcttgatg tctctgacca gacacccatc aacagtatta ttttctccca
    3781 tgaagacggt acgcgactgg gcgtggagca tctggtcgca ttgggtcacc agcaaatcgc
    3841 gctgttagcg ggcccattaa gttctgtctc ggcgcgtctg cgtctggctg gctggcataa
    3901 atatctcact cgcaatcaaa ttcagccgat agcggaacgg gaaggcgact ggagtgccat
    3961 gtccggtttt caacaaacca tgcaaatgct gaatgagggc atcgttccca ctgcgatgct
    4021 ggttgccaac gatcagatgg cgctgggcgc aatgcgcgcc attaccgagt ccgggctgcg
    4081 cgttggtgcg gatatctcgg tagtgggata cgacgatacc gaagacagct catgttatat
    4141 cccgccgtca accaccatca aacaggattt tcgcctgctg gggcaaacca gcgtggaccg
    4201 cttgctgcaa ctctctcagg gccaggcggt gaagggcaat cagctgttgc ccgtctcact
    4261 ggtgaaaaga aaaaccaccc tggcgcccaa tacgcaaacc gcctctcccc gcgcgttggc
    4321 cgattcatta atgcagctgg cacgacaggt ttcccgactg gaaagcgggc agtgagcgca
    4381 acgcaattaa tgtgagttag cgcgaattga tctg

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