
CloneEZ PCR克隆试剂盒
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
CloneEZ PCR Cloning Kit
- 供应商:
南京金斯瑞生物科技有限公司
- 规格:
24 rxns
CloneEZ PCR克隆试剂盒能够高效、快速、直接地进行无缝克隆,而传统的克隆试剂盒步骤较为繁琐,往往需要限制性酶切、连接,有时还需去磷酸化。该试剂盒可以将目的片段插入任意载体,唯一的要求是,您在设计PCR引物时需要包含一段15-20 bp的与载体同源的核苷酸序列。
产品特性
- 适用于各种自备载体、插入片断、或者酶切位点,30 min即可将产物"同源置换"到目标载体上
- 重组效率高
- 高通量操作,批量克隆(可以用8连管,24、48、96孔板做高通量克隆)
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文献和实验Blunt PCR克隆乃利用传统T4连接酶方法,但载体和Topo平端的一样,含ccdB基因,所以同样可降低菌落背景,易于筛选。 表10 PCR克隆试剂盒的选择 Amplification Enzyme Application of Cloned PCR Product Ligation Method Product
和Topo平端的一样,含ccdB基因,所以同样可降低菌落背景,易于筛选。 表10 PCR 克隆 试剂盒的选择 Amplification Enzyme Application of Cloned PCR Product Ligation Method
DNA结合的引物长度足够的条件下,其5’端碱基可不与模板DNA互补而呈游离状态,因此可在引物5’端加上限制性内切酶位点、启动子序列或其它序列等以便于PCR产物的分析克隆等,引物的5’端最多可加10个碱基而对PCR反应无影响。 PCR反应系统总体积10 μl,模板DNA的量为植物总DNA 10 ng。 PCR反应体系(10 μl) 各对引物的复性温度不一样,用x代替。延伸时间用y代替,其中片断长度如果大于1kb,y为1.5 min;大于2kb,y为2.0 min;片断长度如果小于1kb,y
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