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- 详细信息
- 文献和实验
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255
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别提示:包括PCR 克隆试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:PCR 克隆试剂盒
产品规格:20次
特性:
单克隆所有类型的 PCR 产物更为简单,包括平末端和 TA 末端
克隆速度快,连接仅需 5 分钟
筛选简单,几乎没有克隆背景,不需要蓝白斑筛选
无需纯化步骤,节约时间
两侧的限制性内切酶酶切位点方便亚克隆,包含两种单酶切选择
概述:
我公司PCR试剂盒提供:优化的 2X 克隆预混液(其中配有独特的连接增强剂)和线性载体。该线性载体利用最新技术抑制背景菌落生长,使背景值降为最低。本试剂盒能简单、快速克隆各种 PCR 产物。具有校读功能的聚合酶产生平末端扩增子(如:Q5 或者 Phusion),无校对功能的聚合酶产生单碱基突出末端的扩增子(如Taq、OneTaq、LongAmp Taq)。2X 克隆预混液中包含有末端修复成份,可在连接反应步骤前进行末端平齐化,因此,无论扩增子是何种末端都能完成有效连接。此外,使用本试剂盒,PCR 产物无需纯化,PCR 引物也无需经过 5´ -磷酸基修饰。
●提供下游菌落 PCR 或测序引物
●试剂盒包含 1 kb 扩增子对照和线性载体及一次用量的大肠杆菌感受态细胞
●比其它商业化产品保质期长(12 个月)
PCR 克隆试剂盒包含:
– 克隆预混液
– 线性化 pMiniT™ 载体
– 对照扩增子
– 克隆检测正向引物
– 克隆检测反向引物
– 我公司10-beta E. coli 感受态细胞(克隆级)(仅在 E1202 提供)
质保声明“
我公司PCR 克隆试剂盒经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
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文献和实验Blunt PCR克隆乃利用传统T4连接酶方法,但载体和Topo平端的一样,含ccdB基因,所以同样可降低菌落背景,易于筛选。 表10 PCR克隆试剂盒的选择 Amplification Enzyme Application of Cloned PCR Product Ligation Method Product
和Topo平端的一样,含ccdB基因,所以同样可降低菌落背景,易于筛选。 表10 PCR 克隆 试剂盒的选择 Amplification Enzyme Application of Cloned PCR Product Ligation Method
DNA结合的引物长度足够的条件下,其5’端碱基可不与模板DNA互补而呈游离状态,因此可在引物5’端加上限制性内切酶位点、启动子序列或其它序列等以便于PCR产物的分析克隆等,引物的5’端最多可加10个碱基而对PCR反应无影响。 PCR反应系统总体积10 μl,模板DNA的量为植物总DNA 10 ng。 PCR反应体系(10 μl) 各对引物的复性温度不一样,用x代替。延伸时间用y代替,其中片断长度如果大于1kb,y为1.5 min;大于2kb,y为2.0 min;片断长度如果小于1kb,y
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