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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6-12months
- 英文名:
Recombinant Trophoblast Glycoprotein (TPBG)
- 库存:
大量
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。
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文献和实验填料 根据亲和层析的几种应用方向,亲和层析的填料主要分为标签蛋白纯化填料、抗体及抗体片段纯化填料、族特异性亲和填料以及预活化填料四种。 1. 标签蛋白纯化填料 为了简化纯化流程以及方便后期的检测,在进行重组蛋白表达时往往会加入标签。常用的标签包括His标签、GST标签、Strep标签及MBP标签等 (表8)。His标签由于分子量很小,几乎不会影响靶蛋白结构和功能而被广泛使用。GST和MBP标签常用于促进蛋白的可溶表达,尤其对于难表达的真核细胞蛋白和病毒蛋白有很好的促溶表达能力。Strep
成像颜色褐色介于蓝色与蓝紫色之间(可用于双染)棕红色蓝紫色毒性有(疑有治癌作用)无有无选择 R&D Systems 抗体的四大理由:Purification-采用抗原亲和纯化的方式对抗体进行纯化,纯化后的抗体具有更好的特异性;Antigens-使用重组蛋白作为制备抗体的免疫原,大大提高了抗体对抗原的特异性识别能力;Specificity-批次间稳定性的严格控制,有效保证了 R&D Systems 目录抗体在识别抗原时的特异性;Source-多种宿主来源,以及多种单抗或多抗的选择,为客户提供了更丰富、更
,蛋白A 琼脂糖凝胶FF 有很好的稳定性,能耐受37 度3-5 天而对柱子的性能没有影响,是分离抗体的最佳选择。疏水色谱色谱填料苯基琼脂糖凝胶FF 以及DEAE 琼脂糖凝胶FF 也场用于抗体的分离,只是特异性不如重组蛋白A 琼脂糖凝胶FF 好。纯化IgG 抗原最有效的办法是免疫亲和,具体的方法是把抗抗原的IgG 直接偶联到环氧活化琼脂糖凝胶FF 上,然后直接高pH 吸附,低pH 洗脱就可以得到需要的抗原。对于高亲和力的抗体筛选,特别是小分子的半抗原,我们建议可以把半抗原偶联到环氧活化琼脂糖凝胶FF
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