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6-12months
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Recombinant Osteocalcin (OC)
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大量
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泽叶生物
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50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。
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文献和实验the reconstituted vial to sit at 4oC for at > 2 hours before use. (将重悬液在4oC静置2小时以上) 3. This solution can be stored at 2-8oC for up to 1 week. 第 3 步:该重悬液在 2-8oC 最长可保存 1 周。 用说明书上推荐的溶液将细胞因子或重组蛋白重悬到推荐的浓度后,细胞因子或重组蛋白可放置在2-8o C,即冰箱的冷藏室。在这种条件下,细胞因子或重组蛋白的活性
)。这种情况下,您最好能将要溶解的细胞因子或重组蛋白放在水平摇床(shaker)上低速摇一段时间,促使细胞因子或重组蛋白完全溶解。 有些蛋白,如重组人IL-13 Variant (产品编号:200-13A)虽然难溶,但却不需用摇床来加速溶解。其说明书上的备注为:Allow the reconstituted vial to sit at 4oC for at > 2 hours before use. (将重悬液在4oC静置2小时以上) 3. This solution
【求助】请教非单一且高度同源基因的RNAi问题,研究过小鼠骨钙素的请进
简繁 小鼠有三个串联的骨钙素(BGP,或OC)基因OG1、OG2、ORG,其中OG1和OG2在骨中表达,其基因序列高度同源但不完全一致,产物mRNA及蛋白亦稍有序列差别。 但是看文献中的骨钙素mRNA 的RT-PCR检测,均不提引物根据哪个基因设计;蛋白水平的检测亦不区分BGP1和BGP2,市面的小鼠骨钙素放免或酶免试剂盒亦笼统一用。 请教:我要做小鼠源成骨细胞的BGP RNAi,该以哪个基因为靶基因?随便选其中一个还是两个都照顾到?做RT
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