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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
三年
- 英文名:
pMYs-IRES-Puro
- 库存:
60
- 供应商:
信裕生物
基本信息
| 质粒类型: | 逆转录病毒表达载体 |
|---|---|
| 载体大小: | 5854 bp (查看载体序列) |
| 载体抗性: | Ampicillin |
| 筛选标记: | Puromycin |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY8101 | pMYs-IRES-Puro | 5ug质粒 |
¥2000.00 |
质粒图谱
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文献和实验进而可以启动下游基因的翻译。处在IRES元件上下游的两个基因同时转录,独立翻译,最终得到两个独立的蛋白。优点:独立翻译,进而可以表达得到完整的目的蛋白;缺点:IRES的结构较大,其应用常受到载体容量的限制,并且IRES对下游基因翻译起始能力相对较弱,因此经常为保证目的基因的表达,将荧光蛋白放在IRES下游,可能会导致荧光偏弱。 3.不同病毒载体对比及应用:
性维持 → 确定工作浓度 快速版: 载体带 Puro 抗性 → puromycin,多数细胞 1~10 μg/ml 载体带 Neo 抗性 → G418,浓度范围更大,筛选周期更长 载体带 Bsd 抗性 → blasticidin,起效快、用量低 双载体系统(如 Cas9 + sgRNA)→ 两种抗生素同时维持,各取筛选浓度的 1/2~1/4 或更低 --- 一、三种常用抗生素对比 Puromycin(嘌呤霉素) Neomycin/G418 Blasticidin(杀
大基因做慢病毒总是滴度低?先换成大基因专用载体 GV747 再说
、抗性、2A/IRES和其他调控元件一起算进去。越靠近载体能力边界,越应该在正式包装前做小规模验证,而不是只看理论容量。 容量账怎么算(对照表) 载体类型 理论总容量 必需元件占用 目的基因可用空间(经验值) 备注 常规慢病毒载体 约 8-9kb 约 2.5-3kb 约 2.5-4kb 表现最稳 超过 4kb 滴度下降明显 大基因专用载体 GV747 优化骨架,缩减冗余元件 明显低于常规骨架(具体以官方为准) 4-5kb 为主力区间 ≤5kb 承诺滴度与出毒 GV747 用于
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