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- ATCC
- 美国
- CRL-1318
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
XYbscience
- 细胞类型：
贴壁细胞
- 组织来源：
乳腺
- 物种来源：
小鼠
- 细胞形态：
实体瘤
- 器官来源：
小鼠
- 运输方式：
干冰运输or活细胞运输
- 生长状态：
体内生长
- 规格：
1×10^6 cells/瓶
615小鼠乳腺癌瘤株产品基本信息
细胞名称: Ca763,615小鼠乳腺癌瘤株
种属来源: 小鼠
组织来源: 乳腺
疾病特征: 乳腺癌
细胞形态: 实体瘤
生长特性: 体内生长
培养基: -
生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃,
传代方法: 1：2至1：6，每周2次。
冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存
支原体检测: 阴性
Ca763,615小鼠乳腺癌瘤接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
Ca763,615小鼠乳腺癌瘤培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
Ca763,615小鼠乳腺癌瘤培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
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文献和实验Neuron：北大陈雷研究组报道胞内钙离子对 TRPC3/6 通道调控的机制
3/6 的结构机制，作者们解析了 TRPC3/6 通道的一系列高分辨率冷冻电镜结构。通过结构比较，作者们在 TRPC3/6 中发现了 3 个 Ca2+ 结合位点（CBS1-3）。 随后的点突变、电生理和热稳定性实验证实了 CBS1 为 Ca2+ 抑制性位点，CBS3 为 Ca2+ 激活性位点。Ca2+ 在抑制性 CBS1 的结合导致 TRPC3/6 通道胞内区的结构更加紧凑，使阳离子无法从胞质内空腔中顺利流出，从而使电流减弱。进一步地，作者们使用全细胞记录模式，发现 Ca2+ 通过抑制性 CBS1 和激
2）是一种氧气传感器，对细胞缺氧适应性至关重要。近年来的研究发现，PHD 抑制剂（PHIs）和针对 PHD2 的小干扰 RNA（PHD2shRNA）可以在不影响细胞能量水平的情况下激活 AMPK，将细胞缺氧信号转化为能量代谢信号，使细胞产生能量保护反应，并显著提高细胞对缺氧的抵抗力。研究还发现，信号分子钙（Ca2+）在响应缺氧的 AMPK 信号通路激活中发挥着重要作用。然而，PHD 活性如何增加细胞内 Ca2+水平并激活 AMPK 信号通路的分子机制仍然不清楚。 实验设计和主要研究结果： 确认
； c 如果是采血后检测细胞因子，则不建议使用EDTA抗凝。 从图中结果可以看出，使用两种抗凝剂抗凝后，检测细胞因子，EDTA 抗凝样本的 IFN-γ 表达量明显低于肝素抗凝样本。 由于 EDTA 能与 Ca2＋ 螯合，导致细胞因子刺激剂——离子霉素（Ionomycin）转运的 Ca2＋ 减少，而 Ca2＋ 又是细胞因子分泌必不可少的物质，因此，进行细胞因子检测，建议使用肝素抗凝。 **不论使用哪种抗凝剂，采血后一定要让抗凝剂与血液充分混合，才能达到抗凝的效果。
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