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- 2025年11月24日
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泽叶生物
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6-12个月
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100ml
分子生物学技术
真核细胞DNA的制备与定量|质粒DNA的碱裂解法提取与纯化|λ噬菌体DNA提取|DNA分子的限制性 内切酶消化|DNA片段回收与纯化|目的基因的亚克隆|PCR|引物参数计算|PCR产物的克隆|DNA序列测 定|Southern 杂交|PCR-SSCP|细胞凋亡|RNA操作中的一般要求|RNA的制备|mRNA的分离与纯化|RT-PCR|Northern Blot|RPA|ddPCR|原位杂交|原核表达|蛋白SDS电泳|Western|表达蛋白的分离与纯化|表达 蛋白的生物学活性的检测|真核转染
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文献和实验【原创】暗室实验（化学发光底物检测方法）及Western Blot实验优化方法
的斑点印迹的操作方法。 注：所有的抗体稀释度假定起始浓度为1 mg/mL。 1. 用TBS 和PBS 稀释的蛋白样品，好的稀释方法是由样品中的抗原稀释浓度决定的，但是由于抗原的浓度是未 知的， 所以有必要进行宽范围的稀释度的检测。SuperSignal West Pic 化学发光底物的检测灵敏度可达皮g 水平，所以样品的稀释范围可以从微克水平到皮克水平。如果要使用过多的抗原，结果会出现以下情况：非特异性条带、模糊条带和信号降低。 2. 准备转印膜。所需膜的数量依赖于被屏蔽的一抗和/或二抗
如下: 厂家 灵敏度 方法 SuperSignalâ West Pico 化学发光底物
实验过程： 1. 将SIGMA公司HRP标记的羊抗兔1：10，000开始，5倍稀释。 点1ul到NC膜上，点完后迅速泡到PBS里。 2. 配好发光底物后取出膜，将SuperSignal West Pico与ELC prime 分别加200ul到两块膜上。1min后，在膜表面覆盖塑料膜。 3. 照相 4. 将照相后的膜使用蒸馏水冲洗，然后加入TMB显色底物显色，看两膜显色深浅有无差别。 结果：1. 发光情况 30s结果 1m30s 5m
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