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- 英文名:
Taq Plus DNA Polymerase Recombinant
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期货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
250U
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文献和实验枪法(Biolistic-bombardment)(植物细胞) Transfer of T-DNA from Agrobacterium into a plant cell Regeneration of leaf disks infected by Agrobacterium DNA重组 外源基因插入与否可通过载体上的Lac Z基因进行初步的筛选。有外源基因插入的细菌呈白斑,无外源基因插入的细菌呈蓝斑
1实验原理 DNA重组分子在体外构建完成后,必须导入特定的受体细胞,使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状,这个导入过程及操作统称为重组DNA分子的转化。对于不同的受体细胞,往往采取不同的转化战略。1.1 DNA重组分子的常用转化方法 1.1.1 Ca 2 诱导转化1970年Mandel和Higa发现用CaCl2处理过的大肠杆菌能够吸收l噬菌体DNA,此后不久,Cohen等人用此法实现了质粒DNA转化大肠杆菌的感受态细胞,其整个操作程序为:1)将处于对数生长期的细菌置入0℃
在体外将两个或多个来源相同或不相同的 DNA 片段连接成新的重组 DNA 分子,再转到特定宿主细胞中进行自主复制并表达。这是分子生物学中的基本技术。DNA 重组技术的基本程序包括:(1)获得外源 DNA:外源 DNA 是进行 DNA 重组的目的 DNA 片段,一般采用 DNA 聚合酶链式反应 (PCR) 或逆转录-DNA 聚合酶链式反应 (RT-PCR)、基因组文库或 cDNA 文库筛选等方法获得。(2)载体的构建或选择:分子生物学中用的载体是指能在特定宿主细胞中自主复制的 DNA 分子
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