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- 2025年12月04日
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10
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上海远慕生物
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10 x 100 μl
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文献和实验技术、TALEN技术和CRISPR/Cas9技术的基因敲除研究。 实验流程1. 基因组DNA的准备：提取野生型和突变型细胞的基因组DNA。Genloci公司专为阳性克隆筛选设计的TNA抽提试剂盒也能帮您的忙，只需500个左右的细胞即可提取全基因组DNA。 2. 杂交DNA的准备：a) PCR引物设计：一般扩增产物长度为300~600 bpb) PCR扩增：获得杂交DNA 3. Cruiser™酶筛选阳性克隆：无需纯化DNA，直接使用PCR产物，混合体系后45℃下反应15~20 min K562
一步实现单拷贝到高拷贝的转换－－Copy Control克隆技术（附图）
这个载体含有两个复制起始位点（如图1）：单拷贝的大肠杆菌F-因子复制子，和诱导型的高拷贝oriV。 OriV的启动，需要trfA基因产物，trfA基因既不在pCC1 Vector上，也不在其他常规用来克隆的大肠杆菌菌株中，这个基因由CopyControl 的第二个重要元件—— TransforMax EPI300 E.coli菌株提供。 （二）TransforMax EPI300 E.coli. 这是一个工程菌株，含有受诱导启动子严谨控制的trf A基因，在诱导
一步实现单拷贝到高拷贝的转换---CopyControl克隆技术
TransforMax EPI300 E.coli菌株提供。 2．TransforMax EPI300 E.coli. 这是一个工程菌株，含有受诱导启动子严谨控制的trf A基因，在诱导表达的条件下可以提供启动oriV所需要的trf A基因产物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供这个基因的产物。 图
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