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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
563
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
10次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括超低分子量蛋白Marker(3.3-45kD)库存在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应超低分子量蛋白Marker(3.3-45kD)库存,产品信息:
类别:蛋白质研究
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 超低分子量蛋白Marker(3.3-45kD) | RFT047 | 10次 |
● 储存条件: -20℃保存,开封后有效期12个月。
● 产品简介:
本产品包含2种多肽和3种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3.3kD-45kD。可以用来判断 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。
● 使用说明:第一次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用;本产品每次使用前,要95℃加热处理5分钟。
一. 制胶:I 配制分离胶
1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2.加入10%APS和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3.在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4.静置5-10分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
注:如非必须,不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2.加入10%过硫酸铵和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
4.静置20-30分钟装待凝胶聚合
二. 电泳:1. 取一管分装好的Marker样品,彻底融化,95℃加热处理5分钟,充分混匀后备用。
2. 电泳前,将10×Tris-Tricine-SDS电泳缓冲液(Cat No:CB010)用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的内外槽加入1×缓冲液,轻柔拔出梳子,将Marker或蛋白样品(样品已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:TP050]处理)加入点样孔,根据表二条件进行电泳,至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。注:如果电泳时间过短,染色时,指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽。
三. 染色
根据常规实验步骤,用配方5和6(表三)进行染色和观察。如果使用配方5进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择本公司的FastBlue蛋白染色液(Cat No:RTD6202),该产品能在5分钟之内完成蛋白的染色,不至于小肽在染色和脱色中从凝胶中脱离,是常规染色液的理想替代品。
超低分子量蛋白Marker(3.3-45kD)库存专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:RFT047,3.3-45KD,超低分子量蛋白Marker(3.3-45kD),百奥莱博
我公司为您您提供超低分子量蛋白Marker(3.3-45kD)相关的所有信息,如:第二名称、CAS号、规格、熔点、MSDS、用途、作用、毒性、价格等。规格包装,现货供应,极速发货,实验即可安排,试剂随叫随到,无需等待!
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| RFT043 | 蛋白质研究 | 彩虹预染超低分子量蛋白Marker(1.2-45KD) |
| RFT005 | 核酸电泳和回收 | 200bp DNA ladder(200-3000bp) |
| RFT110 | 克隆与表达 | pRT20-T载体试剂盒 |
| RFT101 | 核酸扩增(PCR) | pfu DNA聚合酶 |
| RFT113 | 细胞及免疫学 | JM109化学感受态细胞 |
| RFT041 | 蛋白质研究 | 66KD单条带蛋白Marker |
| RFT008 | 核酸电泳和回收 | 500bp DNA ladder(500-5000bp) |
| RFT029 | 克隆与表达 | 普通质粒小提试剂盒 |
| RFT078 | 蛋白质研究 | 超低分子量蛋白电泳试剂盒 |
| RFT074 | 蛋白质研究 | 8-16%RealPAGE预制胶 |
| RFT097 | 核酸扩增(PCR) | 5×A-plus MasterMix |
| RFT069 | 蛋白质研究 | 40%丙稀酰胺溶液(37.5:1) |
| RFT057 | 蛋白质研究 | BCA蛋白定量试剂盒 |
| RFT088 | 蛋白质研究 | Western封闭液III(磷酸化抗体专用) |
| RFT070 | 蛋白质研究 | 5×DualColor蛋白上样液 双染料(还原) |
| RFT087 | 蛋白质研究 | Western封闭液II(奶粉) |
| RFT045 | 蛋白质研究 | 超低分子量蛋白Marker(3.3-22KD) |
| RFT067 | 蛋白质研究 | 40%丙稀酰胺溶液(19:1) |
| RFT116 | 工具酶 | T4 DNA ligase |
| RFT099 | 核酸扩增(PCR) | Long Taq DNA聚合酶(含GC buffer) |
| RFT026 | 核酸电泳和回收 | λ DNA/HindIII(125-23130bp) |
| RFT054 | 蛋白质研究 | 考马斯亮蓝快速染色液 |
| RFT086 | 蛋白质研究 | Western封闭液I(BSA) |
| RFT082 | 蛋白质研究 | BCIP/NBT即用型显色试剂盒 |
| RFT108 | 克隆与表达 | 2×ligation solution MasterMix |
| RFT061 | 蛋白质研究 | 10×Tris-Tricine-SDS缓冲液(干粉型) |
| RFT050 | 蛋白质研究 | 非变性电泳高分子量蛋白Marker(66-669 kD) |
| RFT114 | 细胞及免疫学 | JM110化学感受态细胞 |
| RFT073 | 蛋白质研究 | 5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液(干粉型) |
我公司正在火爆促销蛋白质研究系列产品,欢迎您的垂询选购超低分子量蛋白Marker(3.3-45kD)库存。
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文献和实验10%甲醇。H. 想分离的蛋白是分子量260kd的,SDS-PAGE电泳的分离胶浓度多大合适?积层胶的浓度又该用多少?这么大分子量的蛋白容易作Western Blot吗?解答:260kd的蛋白不好做, 分离胶用6%, Stacking Gel 3.5%。I. 如果上样量超载,要用什么方法来增加上样量?如果需要加大上样量使原来弱的条带能看清楚。解答:可以浓缩样品,也可以根据你的目标分子量透析掉一部分小分子蛋白。一般地,超载30%是不会有问题的。如果已经超了不少了,而且小分子量的也要,可以考虑加大
吗?解答:260kd的蛋白不好做, 分离胶用6%, Stacking Gel 3.5%。G. 如果上样量超载,要用什么方法来增加上样量?如果需要加大上样量使原来弱的条带能看清楚。解答:可以浓缩样品,也可以根据你的目标分子量透析掉一部分小分子蛋白。一般地,超载30%是不会有问题的。如果已经超了不少了,而且小分子量的也要,可以考虑加大胶的厚度,可以试试1.5mm的 combH. 蛋白变性后可以存放多久?解答:-80℃,一两年没有问题。最关键两条:不要被蛋白酶水解掉;不要被细菌消化掉(也是被酶水解
有问题的。如果已经超了不少了,而且小分子量的也要,可以考虑加大胶的厚度,可以试试1.5mm的 comb。J. 蛋白变性后可以存放多久?解答:-80℃,一两年没有问题。最关键两条:不要被蛋白酶水解掉;不要被细菌消化掉(也是被酶水解了)。K. 我所测定的蛋白分子量是105KD,按理说分离胶应当采用7.5%,但我所查资料却要求分离胶和浓缩胶均采用11%的配方,不知为何?解答:上述您提到的两种凝胶均可以使用,因为105KD的蛋白在上述两种胶的线性分辨范围内,但需注意条带位置。L. 接下来我准备采用DAB显色
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