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- 货号PN 541060
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
E.coli O104 ELISA Test Kit
- 库存：
100
- 供应商：
齐一生物
- 规格：
50T
试剂盒特点
1.本产品采用免疫学检测方法定量检测样品的含量。
2.检测范围见说明书 。
3.这个试剂盒有很高的重复性，变异系数在10%之内。
4.操作简单，整个过程仅花费2.5小时
5.试剂盒的形式是96孔微孔板，可以同时检测多个样品，花费合理。
安全性提醒
试剂盒避免皮肤和粘膜接触终止液；以上各溶剂不小心滴到皮肤上请用水冲洗。
自配仪器
l 50μ L ～200μ L 单道或多道移液器及相应吸头
l 100μ L ～1000μ L 单道移液器及吸头
l 振荡器，计时器
l 450nm 滤光片的酶标仪
l 离心机，分析天平
l 分析纯甲醇试剂
试验准备
1. 使用前使试剂盒回复到室温（19℃-25℃）。
2. 从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条，放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。置于4-8℃ 保存。
3. 标准液，酶结合物，底物，终止液不用稀释直接使用。
4. 5X洗液在使用前要以1：5的比例稀释后使用。例如：1X洗液=1ml 5X浓缩洗液+4ml蒸馏水
5. 由于终止液中包含硫酸使用的时候要小心。
操作步骤
1. 拆下需要的板孔于微孔板上，每个微孔加入50mL的反应液，
2. 加入50mL的标准品和50mL样品液于所设定的孔中；
3. 在每孔中加入50mL HRP 酶标二抗，用锡纸遮盖好板孔，轻敲微孔板边缘混匀30秒；
4. 室温（22.5±2.5）°C避光孵育60分钟；
5．洗板3次，每次加入250mL 1×洗液，最后一次尽量甩干并在吸水纸上吸干；
6. 加入150mL的TMB底物显色液，用手敲板边缘30秒钟混合均匀；
7. 在室温（22.5±2.5）°C避光培养10~15分钟， 加入100mL的终止液终止反应；
8.在450nm下读OD值(读数前，若微孔板底部的有水分和指痕要用无绒布擦拭除去，有气泡要用干净枪头戳破)。
注意事项
1.仅用于研究、不用于个人
2.在操作前半小时从冰箱中拿出试剂盒使其恢复到室温（18-25°C）。
3.不同试剂盒的中的试剂不要混用
4.储存在2-8 °C
5.不使用过期产品
6.使用完试剂盒后根据当地的法规处理废液。
7.为了增加准确性推荐在检测中做两个重复。
注意
在试验中要穿保护性衣服，戴手套和眼镜保证和试剂盒中的液体接触。
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文献和实验肠埃希氏菌（E. coli）通常称为大肠杆菌，是Escherich在1885年发现的，在相当长的一段时间内，一直被当作正常肠道菌群的组成部分，认为是非致病菌。直到20世纪中叶，才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性医学教育|网搜集整理，尤其对婴儿和幼畜（禽），常引起严重腹泻和败血症，它是一种普通的原核生物，根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类：致病性大肠杆菌（EPEC）、肠产毒性大肠杆菌（ETEC）、肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）、肠出血性大肠杆菌（EHEC）、肠黏附
o）以及结构基因（lacZ、lacY、lacA）。转录受阻遏蛋白调控，如果加入 IPTG，阻遏蛋白失活，操纵子开始转录。 看到这里是不是很熟悉，你的基因转入质粒以后，是不是用 IPTG 诱导的？加入一定抗性，优化条件，是不是蛋白表达了？具体怎么会表达的，结合上述大肠杆菌的结构，有没有稍微懂一点呢？ IPTG 诱导表达系统 还不太明白，继续看下面这个图。 看懂了过程中，我们就好理解蓝白斑筛选了，细胞中 β-半乳糖苷酶
.Ghrayeb J,Kimura H,Takahara M.EMBO J.1984,3;2437-2442 151.Johnson D L,Middleeton S A.Protein Expression Purif.1996,7:104-113 152.Hoffman C S,Wright A.Proc Natl Acad Sci USA.1985,82:5107-5111 153.Hogset A,Blingsmo O R.J Biol Chem.1990,265:7338-7344 154
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