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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验- - 10mM - Glutamax 2 mM - - 2 mM - A83-01 0.5mM - - 0.5 µM - Penicillin/streptavidin 1% - - - - Kanamycin 1% - - - - Amphotericin/gentamycin 0.2% - - - - CHIR-98014 4mM
IP 3X with lysis buffer and once with 1X kinase buffer (50mM HEPES or Tris pH 7.4, 10mM MgCl2, 10mM MnCl2, 1mM DTT) 3) Prepare Reaction Mix (use 40μl per IP): (per IP) 20μl 2X Kinase Buffer 0.6μl 1mM ATP (final [ ] = 15μM)
5) 20ml 1XTE/LiAc*重悬菌体,Eppendorf Centrifuge 5810R ,700g,5 分钟离 心收集菌体,弃上清。 6) 根据每个转化需要50μl 菌液的量加入1XTE/LiAc 重悬菌体,分装到 Eppendorf 管中,每管50μl 菌液。 7) 每管加约100ng Bait 基因质粒,5μl 预变性的Carrier DNA*,500μl 1X TE/LiAc/PEG*。 8) 放置于30℃培养箱或者水浴中孵育30 分钟,15 分钟时混匀一次
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