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- 2025年07月03日
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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验Dual-Color ELISPOT Assay for the Simultaneous Detection of IL-2 and/or IFN- Secreting T Cells
sources) (for use as control; see Step 13.iv) Coating buffer (dual, IL-2, and IFN- ) Detection buffer for ELISPOT assay Developing buffer for ELISPOT assay Erythrosine B dye H2 O2 (30%; Sigma) Methanol (MeOH; 90
摇晃几下，润一遍，弃掉这些胶液，这时候尽量去干净，动作要快。再正式灌满胶液，插上梳齿。 跑电泳时，可以60V先压约30min，可以看到溴酚蓝变的又细又直，待进入分离胶，可以看到预染的Marker已经分离，就可以将电压调至120V跑完。 转膜与普通的都一样，这里建议30V恒压转2小时(用于80KD以下的蛋白分子），如果有更大的蛋白280KD的mTor,可以再这2h后再加350mA 30min，效果很好，280KD以下90KD以上的都可以加350mA这一步，时间
胶配了6ml，玻板填满插梳子，等凝固。这里我就是想让我的小分子蛋白尽量在浓缩胶里面多浓缩、压扁，这样后续再分离胶里面，即使弥散一些，也总还有剩下的。6、电泳开始，在浓缩胶层里面跑的时候，我是60-70V电压，跑了大概快一个小时，反正就是溴酚蓝都集中在上下层胶的那个界面的位置，并且在界面那里好半天都不动了，那么这个过程我理解就是小分子量蛋白虽然表面电荷和胶里面的SDS相当，但是终究还是会沿着电流方向定向移动的，所以就多压一会吧。然后开始调整电压为110-120V在分离胶里面跑，我是跑到分离胶一半
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