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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验电泳可显示6个碱基差异的梯带。1994年Kim建立了基于PCR 基础上的端粒重复序列扩增法(telomeric repeat amplification protocol, TRAP)。TRAP反应原理见下图。 首先合成一个18nt的TS做上游引物,端粒酶 结合TS末端的GTT并合成agggttag,然后每经过一次转位合成一个ggttag的6碱基重复序列,端粒酶灭活后,加入一个24nt的CX做下游引物,经过多次变性-退火-延伸,扩增端粒酶延伸产物。 2 基本
(as air vent) into one hole and the free ends of the hard and soft tubing through the other 2 holes in the cap into the 250 ml glass bottle (as reservoir) (Fig. 2). Ensure that the hard tubing reaches the bottom of the reservoir (as outflow tubing
内切酶在PCR反应产物中的活性(Activity of Restriction Enzymes in a Primer Extensio
通常PCR反应以后还要对产物进行酶切才能进入下一步工作。为了方便起见,我们可以将内切酶直接加入到PCR反应产物中去,而省略了纯化产物的步骤。下表归纳了在PCR产物混合物中各种限制性内切酶的酶切活性。 酶切反应条件如下:在20 µl PCR产物混合体系中加入5U的内切酶,按相应的反应温度温育1小时。通常20 µl PCR产物体系中含有1 µg底物DNA,1单位的Vent DNA聚合酶,1× ThermoPol Buffer [10 mM KCl, 20 mM Tris-HCl (PH
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