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- 百奥莱博
- 北京
- KFS063
- 2025年07月07日
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- 文献和实验
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- 保存条件：
4℃
- 保质期：
12个月
- 库存：
673
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
500ml
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京WB抗体清除液(中性,去污剂法)大量库存促销在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。
名称：北京WB抗体清除液(中性,去污剂法)大量库存促销
编号：KFS063
产地：国产|进口
规格：500ml
Western Blot 抗体清除缓冲液(Stripping buffer)，用于Western Blot 中做完免疫杂交之后的膜重复利用。在Western 中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测其它蛋白，通过使用抗体清除液，充分去除结合的一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE 胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。
Western Blot 抗体清除缓冲液，经过多个抗体的检测试验，通常可以重复利用膜3-5 次。
中性抗体清除液基于去污剂法，无腐蚀性，可快速地应用于PVDF 膜上一抗和二抗的去除。
使用说明
1. 在完成Western 化学发光检测后，蒸馏水中漂洗5 分钟。
2. 弃蒸馏水，加入适量的Western 一抗二抗去除液(中性)，至少需把膜完全覆盖。在摇床上漂洗10 分钟。
3. 弃抗体清除液，并吸尽残余液体。加入TBS、TBST 或PBS 漂洗3-4 次，每次在摇床上漂洗3-5 分钟。
4. 进行封闭(blocking)等Western 的后续操作。
注意事项
1. 为取得最佳效果，推荐使用PVDF 膜。
2. 如多次重复使用同一张膜5 次以上，有可能会导致蛋白信号的减弱，建议膜重复使用不超过5 次。
3. 使用ECL 等类似的化学发光试剂进行的Western Blot 检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western Blot检测，例如DAB，NBT/BCIP 等，不适用于本试剂。
储存：4℃，有效期12个月。
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制成50％ 悬液。 每 1mL 细胞裂解液上清加入 100 µL Agarose protein A+G 珠子，4℃ 振荡 10 min，进行预清除。 4℃，10000 rpm 离心10 min移去 Agarose protein A+G 珠子，转移上清至一新离心管中。 用 Bradford 法（考马斯亮蓝染色法）测定上清蛋白浓度。（应至少将细胞裂解液作 1:10 稀释后再测定，这是因为存在于裂解液中的去污剂成分会干扰考马斯亮蓝的作用）。 根据所测得的细胞裂解液蛋白浓度，用 PBS
和运行时可作为样品的pH 指示剂（图 3A）。常用染料包括溴酚蓝、二甲苯青、苯酚红、和橙色 G。选择上样缓冲液时,需注意染料的表面迁移（s）（图 3B, 表 5 和 6）以避免遮盖目的核酸条带,特别是分子大小接近时（图 3C）。染料遮盖会影响目的条带的分析和量化，导致结果不可靠。 图 3. 中性pH中染料颜色。（B）在 TAE 和 TBE 缓冲液中不同百分比琼脂糖里的染料迁移。（C）在可视化过程中染料阴影遮盖条带。 3. 运行电泳 在凝胶、标准品和样品制备后，进行电泳。拆卸梳子和添加电泳缓冲液
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