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文献和实验早期的文章介绍了如何提取土壤DNA。大篇幅详细讲解了影响DNA得率和纯度的研磨均质 、化学试剂 (重点是裂解缓冲液)等问题。做DNA远没有做RNA压力大。不用太担心降解,得率还挺高。RNA就不一样,提取土壤RNA是环境分子生物学研究最难的研究方法之一。RNA提取本身就是件艰巨的任务,提取土壤的RNA挑战更大。最大的困难之一是土壤RNA得率。从土壤中获得RNA远比DNA少,前者仅有后者的10-20%,所以需要比提DNA更多的加样量。因此需要用更大的研磨管(15ml)和更大的离心机。另一
器保持垂直线或20 度以内倾角。(2)针对高粘度样品可采用反向模式移液,即同常规移液模式相反的流程(第二停止点吸液,第一停止点排液)4. 通过采取以下几项措施,可以防止液体进入套柄内 (1)利用RAININ 公司带滤芯的吸头,它有个内部疏水过滤器,避免气雾和液体进入套柄; (2)当吸头中有液体时,不要颠倒或平放移液器; (3)缓慢吸液,握住移液器保持垂直或20 度以内倾角; (4)量程在5 ml 和5 ml 以上的移液器,配合使用厂家提供的专用安全
,可将其浸入稀 HNO3 溶液中,在超声波清洗器中超声 10~15min,即可将堵塞的固体杂质洗出,若清洗后仍不能达到要求,则应更换滤芯。 二、脉动阻尼器: 活塞往复泵输出的压力脉动会引起基线波动,可在高压输液泵出口与色谱柱入口之间安装一个脉动阻尼器(又称缓冲器)来消除压力脉动。 1、可调弹簧式脉动阻尼器: 可调弹簧式脉动阻尼器是最常用的脉动阻尼器,由一根外径约 1.1~1.5mm、内径 0.25mm、长约 5m 的不锈钢螺旋状毛细管组成,利用挠性来阻滞压力和流量的波动。毛细
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